HLA等位基因型及记忆B细胞的功能亚群与重症肌无力患者的相关性分析

作     者：马桠楠 

作者单位：宁夏医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：周翔鱼

授予年度：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：重症肌无力 HLA等位基因 记忆B细胞 

摘      要：目的本研究旨在通过分析重症肌无力（myasthenia gravis,MG）患者T、B细胞亚群的分布及功能特点、寻找MG与人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）等位基因之间的关联性以及筛选抗乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor,ACh R）抗体的优势表位,以此为MG患者的诊断及治疗提供一定参考。方法收集符合纳入排除标准的MG患者以及健康对照者分为MG组和健康对照组。用流式细胞仪检测外周血中T细胞、B细胞亚群的分类及计数,为研究治疗方式对T、B细胞亚群表达水平的影响,将MG组进一步为分为常规治疗组和免疫抑制剂治疗组,并用统计学方法分析比较各组人群T、B细胞亚群表达水平的差异及其与MG的相关性。对MG组和健康对照组行HLA等位基因型测定,并用统计学方法分析MG与HLA等位基因间的关联性。使用生物信息学方法筛选可能的ACh R优势肽段。用酶联免疫斑点技术鉴定经人工合成ACh R肽段刺激后,各组人群外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）中分泌免疫球蛋白1（immunoglobulin 1,Ig G1）的特异性B细胞的计数,并用统计学方法比较各组间特异性B细胞计数的差异。结果1.流式细胞术分析示各组间T细胞亚群比例及活化率均无统计学差异（均P0.05）;免疫抑制剂治疗组B细胞表达水平低于常规治疗组（P0.05）。4.经抗原肽分子对接模拟示ACh Rα88-96（NPDDYGGVK）肽段和ACh Rε88-98（SKDDFGGIETL）肽段为优势肽段。***组PBMCs中分泌Ig G1的特异性B细胞计数明显高于健康对照组（P0.01）;经ACh Rα88-96肽段刺激的患者PBMCs中分泌Ig G1的特异性B细胞计数高于经ACh Rε88-98肽段刺激的患者（P0.05）。结论1.免疫抑制剂可以通过阻断记忆B细胞、SM B细胞亚群存活和分化而减轻MG患者疾病严重程度并降低ACh R抗体滴度。2.动态监测记忆B细胞亚群在血液中的组成变化可以部分反映MG患者的治疗效果。3.线性ACh Rα88-96肽段较ACh Rε88-98肽段是抗ACh R抗体的优势表位。