TRIM67对小鼠嗅球发育的影响

作     者：蔡春雨 

作者单位：四川农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈正礼;黄超

授予年度：2023年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：TRIM67 嗅球 僧帽细胞 PlxnC1 小鼠 

摘      要：目的:TRIM67是具有E3泛素连接酶活性的TRIM家族I类成员之一,在癌症、炎症和神经发育上均有重要作用。已有研究发现,TRIM67在小鼠嗅球中高表达,但其在嗅球中的具体作用还有待探究。本研究拟通过TRIM67基因敲除小鼠,探究TRIM67在小鼠嗅球发育过程中的作用,从而为进一步完善TRIM67甚至TRIM蛋白家族在生物体中的功能研究奠定基础。方法:对C57BL/6野生型(Wildtype,WT)小鼠和TRIM67基因敲除(Knockout,KO)小鼠进行标准饲喂,取所需年龄段小鼠嗅球并称重。并用于各种形态学研究(HE染色、Nissl染色、原位杂交、免疫荧光染色、高尔基染色、电镜实验)和分子生物学研究(q RT-PCR、Western blot)。HE和Nissl染色用于观察小鼠嗅球病理损伤;原位杂交用于定位TRIM67在嗅球中的表达;免疫荧光染色用于观察嗅球中增殖相关蛋白的表达;高尔基染色和电镜用于观察僧帽细胞树突形态及突触结构;分子生物学研究用于探究僧帽细胞突触发育机制中相关基因的转录水平及蛋白表达水平。结果:TRIM67在小鼠嗅球的僧帽细胞层大量表达。TRIM67缺失后,增强了胚胎期小鼠嗅球神经祖细胞的增殖能力,导致僧帽细胞的数量显著性增多。但与此同时,小鼠嗅觉功能减弱。此外,TRIM67还表现出调控僧帽细胞突触发育的能力。高尔基染色和电镜结果显示:TRIM67缺失导致僧帽细胞树突棘和突触显著性减少,同时突触功能相关基因的转录水平也显著性降低,并且TRIM67的这种作用可能是通过调控Sema7A/PlxnC1信号通路来实现的。结论:TRIM67能够调控僧帽细胞的增殖并通过Sema7A/PlxnC1途径影响僧帽细胞突触发育,从而影响小鼠嗅觉功能。