犬血清中MMP2和MMP9与肿瘤疾病的相关性研究

作     者：江鲜雨 

作者单位：海南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：裴世敏

授予年度：2023年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：犬肿瘤性疾病 生物标志物 转移 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 

摘      要：近年来,犬肿瘤性疾病的发生率逐年增高。其中乳腺肿瘤、肥大细胞瘤、黑色素瘤、淋巴瘤等较为常见,尤其是犬乳腺肿瘤,多发于老年母犬,具有高转移性和高致死率,已经成为严重危害犬健康的肿瘤性疾病。基质金属蛋白酶参与正常生理过程中细胞外基质的分解,也参与肿瘤疾病的转移、炎症反应和血管生成,可作为疾病诊断的生物标志物。目前在兽医临床上病理组织学检查依旧是肿瘤疾病诊断和预后的主要评估指标,但存在一定的滞后性,且需要对动物进行侵入性的组织切除操作。而血清中的肿瘤标记物可实现非侵入性的肿瘤诊断和预后,减少对动物的创伤并降低风险。为了明确基质金属蛋白酶作为犬肿瘤性疾病血清生物标志物的潜力。试验采用了酶联免疫吸附方法和明胶酶谱分析方法检测血清样本中MMP2与MMP9的蛋白浓度和蛋白活性。结果表明:肿瘤犬血清中MMP2和MMP9的蛋白浓度(中位数分别为127.20μg/mL和222.25μg/mL)均极显著高于非肿瘤犬血清中MMP2和MMP9的蛋白浓度(中位数分别为37.72μg/mL和55.26μg/mL,P0.01);MMP2和MMP9的蛋白活性在肿瘤犬血清中同样分别高于在非肿瘤犬中;并且MMP2和MMP9的蛋白浓度的高低与蛋白活性的高低趋势具有一致性。说明在犬肿瘤疾病中MMP2和MMP9的表达量及活性上调,具有作为肿瘤早期诊断和预后标志物的潜能。此外,通过体外细胞实验,采用了蛋白免疫印迹、细胞迁移的方法发现MMP2和MMP9的高表达与间充质标志物E-钙粘蛋白上调和上皮标志物波形蛋白下调相关,说明MMP2和MMP9可能是通过参与调控上皮间质转化过程来影响肿瘤的转移过程。研究证明了临床犬肿瘤疾病中MMP2和MMP9的含量上调,同时MMP2和MMP9的活性也更高,使其具有成为肿瘤标志物的可能。且肿瘤细胞分泌的MMP2和MMP9能够促进肿瘤的EMT过程从而促进转移和侵袭。