刺激响应型紫杉醇高分子前药联合CHEK2抑制剂保护化疗相关卵巢损伤

作     者：郭艺灿 

作者单位：华中科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王世宣

授予年度：2023年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：化疗相关卵巢损伤 纳米胶束 紫杉醇 CHEK2抑制剂 卵母细胞 

摘      要：目的:化疗相关卵巢损伤对女性自身及子代健康影响较大,如何在增强肿瘤化疗疗效的同时降低生育毒性是目前临床面临的挑战。本研究开发了共递送纳米胶束(BML@PMP),由还原敏感型紫杉醇(Paclitaxel,PTX)高分子前药(PEG-b-PMPMCg-PTX,PMP)和细胞周期检测点激酶2(Checkpoint Kinase 2,CHEK2)抑制剂(BML277)组成,旨在改善肿瘤治疗的同时预防化疗相关卵巢损伤。方法:(1)构建新型纳米胶束及其表征鉴定:采用透析法制备双亲性嵌段聚合物聚乙二醇-b-聚2-丙炔基-2-甲基三亚甲基碳酸酯(PEG-b-PMPMC,PM),将紫杉醇通过二硫键结合到PM侧链上形成PMP,再通过亲疏水自组装的形式负载BML277形成BML@PMP胶束,将荧光染料TB包裹在BML@PMP中形成BML/TB@PMP胶束,并对纳米胶束的理化特点、稳定性和药物释放情况进行检测。(2)探索BML@PMP纳米胶束的抗肿瘤效应:实验分为对照、PTX、PM、PMP和BML@PMP组。包括体外评估药物对乳腺癌细胞4T1的生长、增殖和迁移的影响和体内荷瘤小鼠模型检测纳米胶束抗肿瘤效应,并对其生物安全性进行评估。(3)探究BML@PMP纳米胶束对化疗相关卵巢损伤的保护作用:包括评估纳米胶束在肿瘤化疗中对卵巢内分泌功能和生殖功能的保护作用,并初步探讨其对卵母细胞成熟和后代健康的影响。结果:(1)本研究成功制备了PM、PMP、BML@PMP和BML/TB@PMP四种纳米胶束,其中BML@PMP纳米胶束边界清楚,近似球形,粒径约为100 nm,具有良好的稳定性,在谷胱甘肽(Glutathione,GSH)存在的条件下释放PTX和BML277。(2)PTX、PMP、BML@PMP均能抑制乳腺癌细胞4T1的生长、增殖和迁移,促进其凋亡,并在小鼠体内抑制肿瘤的生长,促进凋亡的发生,其中BML@PMP的效应最好;各组小鼠体重、主要器官功能未见明显差异。(3)PMP、BML@PMP处理后能改善PTX所致的小鼠卵巢内分泌功能下降;PTX组的平均产仔数明显低于其他组,而BML@PMP组可显著提高产仔数;各组子代小鼠健康未见明显异常;PMP和BML@PMP处理后能降低PTX诱导的卵母细胞凋亡的发生。结论:本研究构建了一种新型共递送纳米胶束(BML@PMP),一方面该胶束利用肿瘤组织的高通透性强滞留(Enhanced Permeability and Retention,EPR)效应和高GSH的特点优先在肿瘤组织累积并释放紫杉醇和BML277,发挥协同抗肿瘤的作用。另一方面,BML@PMP纳米胶束到达卵巢的量较少且释放的化疗药较低,同时释放的BML277对卵巢有保护作用,降低了化疗相关卵巢损伤。此外,BML@PMP胶束具有良好的生物安全性。