基于肠肝轴研究加味消脂利肝方通过调节肠道菌群治疗NAFLD的机制

作     者：廖小妹 

作者单位：湖南中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：何文智

授予年度：2023年

学科分类：100506[医学-中医内科学] 1005[医学-中医学] 10[医学] 

主      题：加味消脂利肝方 非酒精性脂肪肝 炎症反应 肠肝轴 肠道菌群 

摘      要：目的:以非酒精性脂肪肝中医理论及现代医学“肠肝轴联系为理论基础,探讨加味消脂利肝方对非酒精性脂肪肝的干预作用及肠道菌群多样性及物种丰富度的变化。以“肠肝轴为指导,以SD大鼠为受试对象,以加味消脂利肝方为代表方剂进行动物实验,通过观察加味消脂利肝方对SD大鼠肝脏病理改变及肠道菌群的影响,探讨加味消脂利肝方治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:实验研究部分:选取SPF级SD大鼠48只,6周龄,体质量200±20g,随机分为空白组（8只）、模型组（8只）、加味消脂利肝方低剂量组（8只）、中剂量组（8只）、高剂量组（8只）、阳性药组（辛伐他汀,8只）,适应性喂养2周后,空白组普通饲料喂养,其余五组高脂饲料喂养造模,成功后按大鼠体质量每100g给药体积1m L计算,空白组、模型组灌胃等体积生理盐水,加味消脂利肝方低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予3.9、7.8、15.6g·kg剂量灌胃,阳性药组给予0.15mg·kg剂量的辛伐他汀灌胃,连续给药2周后取材,以ELISA法测定血清IL-6、TNF-α、IL-1β血脂和肝功能的变化,油红O染色和HE染色对肝脏组织形态进行观察,Western blot检测肝脏组织My D88、NF-κB蛋白表达变化,16Sr DNA高通量测序检测肠道内容物肠道菌群多样性及物种丰富度变化。结果:非酒精性脂肪肝治疗基于肠肝轴研究有丰富理论基础,中医理论中非酒精性脂肪肝主要中医病机为本虚标实,主要病理因素为痰、湿、瘀,加味消脂利肝方从肝脾论治具有祛痰利湿化瘀的功效,对治疗非酒精性脂肪肝具有坚实中医理论依据。动物实验结果显示,与模型组比较,炎性因子IL-6、TNF-α、IL-1β含量降低（P0.05）,肝脏炎性细胞明显减少,脂肪细胞明显减少;加味消脂利肝方能使NF-κB蛋白表达下调（P0.05）,加味消脂利肝方低剂量组肠道菌群α多样性提高（P0.05）。结论:1.基于“肠肝轴理论、中医肝脾同治的治疗原则,中医复方加味消脂利肝方治疗非酒精性脂肪肝具有坚实的理论基础。2.加味消脂利肝方可以抑制高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠的体重增长,降低肝指数,减轻肝组织脂肪变性,改善肝脏病理学变化,可通过下调NF-κB表达,抑制IL-6、TNF-α、IL-1β水平,起到抗炎保肝作用,对非酒精性脂肪肝有较好的治疗效果。3.加味消脂利肝方可通过“肠肝轴,减少对肠道菌群丰富度及多样性的损伤,从而发挥对非酒精性脂肪肝的改善作用。