红千层抗乳腺癌MCF7细胞作用的物质基础及应用研究

作     者：李游 

作者单位：重庆理工大学 

学位级别：硕士

导师姓名：胥秀英

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：红千层 MCF7细胞 配方颗粒 质量标准 

摘      要：乳腺癌发病率和死亡率逐年上升,已成为女性第一恶性肿瘤。目前,针对乳腺癌的治疗方式涵盖手术治疗、放疗、药物治疗等,而药物治疗仍是最重要的治疗方法之一。现有的药物存在骨髓抑制、胃肠道反应、耐药等诸多问题,筛选更加安全、有效的治疗乳腺癌的药物仍具有重要意义。红千层（Callistemon rigidus ***.）是桃金娘科红千层属（Myrtaceae Callistemon ***.）红千层的干燥全珠。本论文以红千层叶为研究对象,对红千层叶抑制乳腺癌MCF7细胞有效成分的提取方法、分离纯化、结构确证、配方颗粒的制备、红千层药材及配方颗粒标准、标准品标准、配方颗粒体外抑制MCF7细胞增殖作用等进行了研究,获得如下结果:1.筛选出了红千层叶有效成分最佳提取条件经单因素和正交优化实验筛选出红千层叶提取最佳条件:以8倍量的70%乙醇回流提取120 min,共提取3次。2.完成了红千层叶有效成分的分离纯化采用了溶剂萃取法、硅胶柱层析法、HPLC制备等方法分离纯化红千层抗乳腺癌MCF7细胞的活性成分,共分离得到4个有效的单体化合物。4个单体化合物对MCF7细胞均有抑制作用,IC分别为18.47±1.62μg/mL、34.68±0.93μg/mL、12.47±0.88μg/mL、77.87±2.06μg/mL。3.确证了红千层叶有效成分的结构通过质谱、核磁等综合解析分离出的4个单体化合物,确证4个化合物分别为桉树素（化合物1）、齐墩果酸（化合物2）、熊果酸（化合物3）、槲皮素（化合物4）,其中化合物1、化合物3均是首次从红千层（Callistemon rigidus ***.）中分离得到。4.筛选出了红千层配方颗粒的最佳制备条件红千层配方颗粒的最佳制备条件为:取适量红千层药材粉末,加10倍量的水煎煮90 min,共煎煮3次,过滤,浓缩,干燥得到浸膏粉;将药材与可溶性淀粉按1:1的比例混合得混合辅料,浸膏与混合辅料按2:1的比例混合,少量多次加入10%的淀粉浆制备软材,过筛,60℃干燥,整粒,即得红千层配方颗粒。5.建立了红千层药材、配方颗粒、标准品质量标准对12批红千层药材性状、TLC鉴别、水分、总灰分、浸出物及含量等进行了研究,初步建立了红千层药材质量标准草案。对3批红千层配方颗粒性状、TLC鉴别、水分、粒度、溶化性及含量等进行了研究,初步建立了红千层配方颗粒质量标准草案。对桉树素的制备方法、性状、鉴别、纯度等进行了研究,初步建立了桉树素标准品质量标准草案。6.开展了红千层配方颗粒体外抑制乳腺癌MCF7细胞增殖作用实验采用CCK8法测定红千层配方颗粒对乳腺癌MCF7细胞的增殖抑制作用,其结果显示,红千层配方颗粒对MCF7细胞有抑制作用,IC值为103±2.13μg/mL。