霉变玉米中黄曲霉毒素脱毒剂的研制及其在肉鸡生产中的应用

作     者：赵闪闪 

作者单位：河南农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：尹清强

授予年度：2021年

学科分类：090502[农学-动物营养与饲料科学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：霉变玉米 黄曲霉毒素B1去除剂 肉鸡 生长性能 肠道微生物区系 

摘      要：目前全球25%的粮食及饲料不同程度地受到霉菌毒素的污染,危害人畜健康并造成巨大的经济损失。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的污染率高及危害大。故作为本研究的重点。试验分为四个部分:第一部分:霉变玉米中AFB]的生物降解:分别从乳酸杆菌(干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌)、枯草芽胞杆菌(K1、K2、K4)、酵母菌(产朊假丝酵母、酿酒酵母、布拉迪酵母)、乳酸假单胞菌中各挑筛选出一个降解率较高的微生物。活菌数1.0×109 CFU/mL,物料:水=72:28,接菌量1%,在30℃、37℃分别培养3d测霉变玉米中AFB1含量、活菌数和重量变化。结果显示枯草芽胞杆菌K4对AFB1降解率为32.91%,产朊假丝酵母对AFB1降解率为55.40%,干酪乳杆菌对AFB1降解率为76.26%,乳酸假单胞菌对AFB1降解率为50.09%。选用上面筛选出具有降解AFB1功能的枯草芽孢杆菌K4、产朊假丝酵母、干酪乳杆菌、乳酸假单胞菌,在1.0×104、1.0×105、1.0×106 CFU/g三个水平上进行响应面设计(Central Composite Design),共计27组(三个中心点)复合微生物菌群组合,研究其对霉变玉米中AFB1的降解率。结果表明,产朊假丝酵母活菌数1×106 CFU/g、枯草芽孢杆菌K4活菌数1×106 CFU/g、干酪乳杆菌活菌数1×104 CFU/g、乳酸假单胞菌活菌数1×106 CFU/g,接菌量1%、37℃发酵3d后,霉变玉米中AFB1降解率最高,达到59.18%。第二部分:AFB1去除剂最佳配比的研究:选取具有降解和吸附AFB1功能的枯草芽孢杆菌K4、来自米曲霉的霉菌毒素降解酶、乳酸假单胞菌、蒙脱石为四因素,分别以枯草芽孢杆菌K4:1×105、1×106、1×107 CFU/mL(在培养体系中的活菌数),来自米曲霉的霉菌毒素降解酶:0.02%、0.04%、0.06%,乳酸假单胞菌:1×105、1×106、1×107 CFU/mL(在培养体系中的活菌数),蒙脱石:0、0.02%、0.04%为三个水平,进行正交试验设计研究不同组合对AFB1的去除率。结果显示,1×106 CFU/mL枯草芽孢杆菌K4、0.02%霉菌毒素降解酶、1×106 CFU/mL乳酸假单胞菌、0.04%蒙脱石组合,在LB培养基中,37℃,80 r/min培养24 h对AFB1去除率最高,达到91.5%。由于枯草芽孢K4和乳酸假单胞菌的冻干粉活菌数都为1×1010 CFU/g,因此该组合在日粮中最佳添加量为0.08%(0.01%枯草芽孢杆菌K4、0.02%霉菌毒素降解酶、0.01%乳酸假单胞菌、0.04%蒙脱石)。第三部分:生物降解霉变玉米及添加AFB1去除剂对肉鸡生长性能的影响:选用1日龄健康AA肉仔鸡400只,饲养前期(1-21 d)随机分为8个处理组,每组5个重复,每个重复10只鸡。饲养后期(22-42 d)仍为8个处理组,每组8个重复,每个重复6只鸡。A组为对照组,饲喂基础日粮;B组为负对照组(霉变玉米替代正常玉米);C组复合菌发酵后的霉变玉米替代正常玉米;D组负对照组+甘草酸(在饮水中的浓度为0.04%):E组负对照组+甘草酸+丁酸梭菌(甘草酸在饮水中的浓度为0.04%,丁酸梭菌在饮水中的浓度为1×107 CFU/mL);F组:负对照组+0.04%霉菌毒素去除剂;G组:负对照组+0.08%霉菌毒素去除剂;H组:负对照组+0.12%霉菌毒素去除剂。结果表明:(1)生长性能:饲养前期,A组肉鸡生长性能显著高于其它组(P0.05),D和G组死亡率最高为4%;饲养后期,A组生产性能显著高于其它组(P0.05)。(2)屠宰性能和器官相对指数:E组小肠相对长度显著高于其它组(P0.05);后期C、E和H组淀粉酶活力显著高于A和B组(P0.05),A和C组蛋白酶活力显著高于其它组(P0.05)。(6)不同组织器官AFB1的残余量:前、后期均是B组粪便、血清、肝脏、胸肌、空肠中AFB1的残余量最高,E组血清和肝脏中AFB1含量显著低于B组(P0.05)。(