厚藤治疗关节炎作用及物质基础研究

作     者：韦棪婷 

作者单位：广西中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：侯小涛

授予年度：2021年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：厚藤 急性痛风性关节炎 类风湿性关节炎 物质基础 血清药物化学 

摘      要：目的:以厚藤为研究对象,对厚藤水提物进行抗急性痛风性关节炎(AGA)及类风湿性关节炎(RA)药理活性评价,并依据血清药物化学的相关理论,利用液质联用技术明确厚藤药效物质基础,为进一步开展厚藤药材质量标准、体内过程及作用机制研究提供基础。方法:1厚藤对AGA大鼠模型的治疗作用研究:预防给药7天,采用尿酸钠诱导大鼠AGA模型,再连续给药2天,观察厚藤对AGA大鼠关节肿胀、足垫肿胀、炎症评分、血清中IL-1β、MIP-1α、MIP-2、RANTES水平、滑膜组织病理切片各项指标的影响,评价厚藤的治疗作用。2厚藤对RA大鼠模型的治疗作用研究:采用胶原结合佐剂诱导RA大鼠模型,观察厚藤对RA大鼠体重、踝关节肿胀、足跖肿胀、关节炎症评分、脏器指数、踝关节病理切片及血清中PGE2、RF、CRP表达水平的影响,评价厚藤对RA模型大鼠的作用。3厚藤治疗AGA大鼠入血成分研究:3.1厚藤水提取物主要化学成分定性分析:利用LC-Q-TOF-MS/MS技术对厚藤水提取物进行定性分析,为后续寻找厚藤入血成分奠定基础。3.2厚藤在正常状态大鼠的入血成分研究:以血清药物化学为理论基础,对正常大鼠灌胃厚藤后的含药血浆的原型成分及代谢物进行定性分析。3.3厚藤在病理状态大鼠的入血成分研究:对比正常空白组、病理空白组、厚藤治疗组大鼠血浆图谱,观察厚藤治疗AGA大鼠给药后的吸收入血成分的变化。结果:1厚藤对AGA大鼠模型的治疗作用研究:厚藤水提物能够减轻AGA大鼠炎症反应,与模型组比较,厚藤组的关节肿胀指数、足垫厚度、关节炎症指数均显著降低(P0.05);滑膜组织病理切片观察到,厚藤高、中剂量组能减轻炎性细胞浸润。2厚藤对RA大鼠模型的治疗作用研究:厚藤对RA大鼠有一定减轻肿胀、缓解滑膜炎症症状的作用,与模型组比较,给药干预后,各给药组的体重均无显著性差异(P0.05);对踝关节肿胀度、足跖肿胀度有减轻趋势但无显著性差异(P0.05),厚藤高、中剂量组能显著降低关节炎症指数(P0.05);踝关节病理切片显示,厚藤高、中剂量组病变程度相对减轻。3厚藤治疗AGA大鼠入血成分研究:3.1厚藤水提取物主要化学成分定性分析:共鉴定53个化合物,包括树脂糖苷类、黄酮类、有机酸类、香豆素类、核苷类、氨基酸类、萜类、木脂素类、酚酸苷类、维生素类多种成分类型,其中有机酸类和黄酮类成分是其主要成分。3.2厚藤在正常状态大鼠的入血成分研究:共鉴定4个入血成分,分别为苹果酸、咖啡酸、咖啡酸甲酯、对羟基苯甲酸。3.3厚藤在病理状态大鼠的入血成分研究:共鉴定4个入血成分,分别为咖啡酸、莨菪亭、咖啡酸甲酯、对羟基苯甲酸。结论:1厚藤可明显改善AGA大鼠关节肿胀,抑制IL-1β、MIP-1α及MIP-2表达,减轻炎症反应。2厚藤对RA大鼠具有较好的治疗作用,这可能与减少PGE2、RF、CRP表达有关。3采用LC-Q-TOF-MS/MS技术可快速鉴定厚藤水提物的主要化学成分为有机酸类和黄酮类。4通过LC-Q-TOF-MS/MS鉴定了厚藤的入血成分为其药效物质基础研究提供了参考。