复方甜地丁对小鼠乳腺增生干预作用及机制研究

作     者：李泽鑫 

作者单位：延安大学 

学位级别：硕士

导师姓名：岳昌武

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：甜地丁 乳腺增生 肠-乳腺轴 微生物发酵 肠道菌群 

摘      要：目的:(1)探究复方甜地丁对乳腺增生动物模型干预效果;(2)初步阐明复方甜地丁干预乳腺增生的作用机制。方法:(1)通过网络药理学研究分析并预测复方的有效化学成分、乳腺增生疾病模型的蛋白靶点以及关键代谢通路的关联,初步预测、评估药物组方的可能生物学效应;(2)采用雌激素、孕激素联合诱导建立乳腺增生模型,通过HE染色技术结合检测脏器指数变化等对疾病模型建立是否成功进行评估;(3)分别将不同剂量的通过水煎、微生物发酵等处理后复方甜地丁产物,作用于乳腺增生模型小鼠,通过检测小鼠脏器指数变化、利用HE染色技术检测乳腺组织病理变化,明确此复方药物对乳腺增生小鼠的干预效果;(4)利用ELISA检测雌激素(E2)、孕激素(P)、催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)等相关激素变化水平,分析药物对乳腺增生相关激素的影响;(5)收集小鼠粪便,检测乳腺增生小鼠用药前后其短链脂肪酸(SCFAs)和肠道菌群水平变化,分析药物是否通过肠-乳腺轴发挥作用。结果:(1)网络药理学结果表明复方甜地丁中含有46个药物活性成分,其活性成分相关靶点1213个,匹配588个乳腺增生病的靶点后,得到50个可能是复方干预乳腺增生的直接作用靶点。(2)乳腺组织切片HE染色结果表明,MODEL组小鼠乳腺腺泡数量、小叶数量增多,导管扩张,乳腺组织呈现增生状态;脏器指数结果表明MODEL组小鼠子宫、肝脏指数相比CONTROL组明显增加,且具有统计学意义(P0.05),可证明激素造模法可以有效建立乳腺增生模型;(3)小鼠经药物干预后,除了TDDH组无变化外,与空白组相比,其他各干预组肝脏指数均降低,具有统计学意义(P0.05);对于肾脏指数而言,与CONTROL组相比,TDDZ组子宫指数降低,具有统计学意义(P0.05);对于子宫指数而言,与CONTROL组相比,MODEL组子宫指数升高,具有统计学意义(P0.01);乳腺增生小鼠经过一个月药物干预后,与MODEL相比,XZW、TDDD、TDDZ、TDDH、WSWD、WSWZ、WSWH组小鼠乳腺小叶数量、腺泡数量减少,导管口缩小,随着用药剂量的增加,乳腺组织弥漫性增生情况改善增加;(4)ELISA检测激素变化结果表明,小鼠经药物干预后,WSWZ组与MODEL组相比,E降低,具有统计学意义(P0.05);TDDD组与MODEL组相比,FSH降低,具有统计学意义(P0.05);(5)模型小鼠经干预后,各组小鼠的短链脂肪酸、肠道菌群丰度发生变化。结论:复方甜地丁可以明显改善小鼠乳腺弥漫性增生,作用机制可能涉及肠-乳腺轴,即药物可增加小鼠肠道内有益菌群的丰度和多样性,进而增强调节机体免疫应答而发挥干预乳腺增生作用。