中国IHH患者中GLI3基因突变的遗传学和功能研究

作     者：徐颖彤 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈志衡;李家大

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：特发性低促性腺激素性性腺功能减退症 GLI3 遗传学 荧光素酶报告基因 蛋白表达 

摘      要：目的:特发性低促性腺激素性性腺功能减退症(Idiopathic Hypogonadotropic Hypogonadism,IHH)是指由于下丘脑-垂体-性腺轴内激素分泌缺损而引起的青春期发育部分或完全缺失。根据有无嗅觉障碍临床表现,将其分为两类,一类是卡尔曼综合征(Kallmann Syndrome,KS),另一类是嗅觉正常的IHH(normosmic IHH,nIHH)。这是一种罕见的生殖功能障碍性疾病,具有高度的遗传异质性。目前研究发现,IHH患者中不仅存在孟德尔遗传模式,即X连锁、常染色体隐性或常染色体显性遗传,还存在更为复杂的寡基因遗传模式,但是其具体的致病机制尚不完全清楚。近年来,已明确GLI3是IHH的致病基因,并且在国外人群中得到验证。本研究中,我们在177名中国IHH患者中筛查了GLI3基因的突变,并进一步研究了其功能改变,以探索其潜在的致病分子机制。方法:在本研究中,我们利用全外显子组测序技术在中国IHH患者中筛查GLI3基因突变;利用荧光素酶报告基因检测新发现的GLI3突变体的活性;利用蛋白免疫印迹技术检测其蛋白表达水平、利用蛋白免疫荧光技术检测其亚细胞定位情况,研究可能的致病机制。结果:1、在177名已确诊为IHH的患者中,鉴定到有7名(3.9%)患者携带不同的GLI3突变体,分别是C935T、A1843T、2487-2501del、C2767T、C3278T、G4007A、T4639A,均为新发现的有害性突变位点;2、在7名先证者中,28.6%(2/7)的患者为nIHH,71.4%(5/7)的患者为KS;85.7%(6/7)的患者携带其他致病基因突变;除生殖系统发育异常外,28.6%(2/7)的患者伴有其他临床表型;3、在体外细胞实验中,7种突变体在活性、蛋白表达及亚细胞定位中,与野生型相比,无显著差异。结论:1、中国IHH患者中GLI3的突变频率为3.9%,与2016年美国数据比偏低(4.1%);2、GLI3可能不单独引起IHH疾病,但可与其他基因以寡基因模式引起该疾病。图21幅,表9个,参考文献81篇