渝东北地区佛手化学成分分析及质量研究

作     者：贺灵芝 

作者单位：重庆三峡学院 

学位级别：硕士

导师姓名：唐华丽;伍蓉

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：佛手 化学成分 网络药理学 质量分析 

摘      要：佛手为药食同源植物芸香科植物佛手Citrus medica *** Swingle的干燥果实,具有疏肝理气、和胃止痛、燥湿化痰的功效,是中医临床常用的疏肝理气药,常用其治疗慢性胃炎、抑郁症等疾病。本研究拟通过对渝东北地区佛手药材的化学成分进行分析,运用网络药理学方法筛选对慢性胃炎发挥主要作用的化学成分,并对渝东北地区不同种植基地的佛手中相关成分进行定量分析,全面掌握渝东北片区经济作物佛手的质量情况。1.利用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术分析渝东北地区佛手中的化学成分,结合文献报道,鉴定了32种化学成分作为佛手治疗慢性胃炎的物质基础,其中有12种香豆素类成分、14种黄酮类成分、3种有机酸、3种柠檬苦素;2.基于网络药理学,利用Swiss Target Prediction等数据库预测32种化学成分相关靶点,通过Gene Cards、OMIM等数据库收集与慢性胃炎相关联的靶点,以STRING数据库构建靶点蛋白相互作用网络;通过DAVID数据库进行GO功能分析与KEGG通路富集分析,探讨佛手治疗慢性胃炎的作用机制,根据化学成分度值的高低分析得到佛手在治疗慢性胃炎的过程中发挥关键作用的化学成分,即槲皮素、木犀草素、山柰酚、异鼠李素等。3.建立高效液相色谱法同时测定佛手治疗慢性胃炎的关键活性成分:槲皮素、木犀草素、山柰酚、异鼠李素,并做线性、精密度、稳定性、重复性、加样回收等方法学验证,通过重复性实验发现未在样品中检测出山柰酚,考虑前处理方法、含量低等因素的影响,故山柰酚不纳入此次含量测定实验,将槲皮素、木犀草素、异鼠李素作为含量测定目标成分。4.对渝东北地区万州、云阳、梁平、石柱的佛手样品同时检测槲皮素、木犀草素、异鼠李素含量,并依据《中国药典》(2020年版)一部中佛手项下含量测定方法测定橙皮苷含量,从各批次样品中槲皮素、木犀草素、异鼠李素、橙皮苷的含量高低进行质量分析。结果显示,优质样品中各个成分含量均较高,但也存在部分样品中橙皮苷含量低、其他成分较高,或者橙皮苷含量较高,其他成分含量低的情况。四种成分含量相关性分析得到,仅槲皮素与异鼠李素之间呈显著正相关,其余成分间无明显相关性,说明此次含量测定实验具有实际意义,能一定程度弥补从单一成分橙皮苷来评价佛手质量的不足。综上,本论文选择渝东北地区佛手作为研究对象,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术研究其物质基础,运用网络药理学研究方法,筛选针对佛手临床常治疾病--慢性胃炎发挥关键作用的化学成分,并检测其含量,以此综合评价渝东北地区佛手的品质。研究结果为佛手的质量标准提供参考,对进一步开发利用佛手具有指导意义。