双歧杆菌四联活菌对SAP大鼠肠屏障功能的影响和相关作用机制的研究

作     者：梁锦慧 

作者单位：右江民族医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：尹毅霞

授予年度：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：双歧杆菌四联活菌 重症急性胰腺炎 肠屏障功能 作用机制 

摘      要：目的:通过建立牛磺胆酸钠诱导的大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)伴肠功能衰竭模型,观察大鼠血清胃动素、胃泌素、二胺氧化酶、D-乳酸的变化情况,探讨双歧杆菌四联活菌对SAP大鼠肠黏膜屏障功能的影响及可能的作用机制,评价在SAP动物模型中双歧杆菌四联活菌对肠功能障碍的防治作用,为SAP伴肠功能衰竭者补充微生态营养治疗提供理论基础。方法:(1)将体重为200-250g的24只雄性Wistar大鼠随机分成3组:益生菌组、模型组及空白组,每组8只大鼠;(2)益生菌组大鼠造模前7天至造模后24h予双歧杆菌四联活菌片0.75g BID,模型组大鼠造模前7天至造模后24h予玉米片0.75g BID,益生菌组及模型组大鼠采用经胰胆管逆行缓慢注射3.5%牛磺胆酸钠制作大鼠SAP模型;(3)造模24小时后麻醉动物后取材,大鼠心脏取血5ml,取全血检测血白细胞计数,离心后取血清检测C-反应蛋白、淀粉酶水平,ELISA法测定血清胃动素、胃泌素、二胺氧化酶、D-乳酸水平,取胰腺组织行病理切片、HE染色,判断SAP是否造模成功及观察胰腺损伤程度;(4)以上收集到的数据运用SPSS27.0软件进行统计处理。符合正态分布的计量资料采用(x±s)表示,组间比较用单因素方差分析,两两比较用最小有意义差别法(LSD法);不符合正态分布的计量资料用M(P25,P75)表示,两组间比较均采用非参数秩和检验。当P0.05时认为数据的差异具有统计学意义。结果:(1)胰腺病理结果:空白组:胰腺小叶结构完整,小叶间隙正常,腺泡、导管及胰岛清晰可见,细胞排列紧密,腺泡细胞可见点状细胞核,未见出血、坏死。模型组:可见胰腺小叶结构模糊不清,分叶消失,小叶间隙明显水肿、增宽,部分腺泡细胞核碎裂或溶解消失,出现大片凝固性坏死,坏死胰腺组织周围可见单核细胞及中性粒细胞等炎细胞浸润,部分区域有脂肪液化坏死,间质小血管壁出血坏死,大量红细胞溢出。益生菌组:胰腺组织结构大体可见,小叶结构稍紊乱,可见小叶间隙增宽、水肿,程度较模型组轻,腺泡细胞肿胀,尚可见肿胀的细胞核,部分胰腺细胞坏死,无脂肪液化坏死,炎细胞浸润程度较模型组明显减弱。(2)益生菌组及模型组白细胞计数与空白组相比明显升高,差异有显著统计学意义(P0.01);与模型组相比,益生菌组白细胞计数显著降低(P0.01);(3)益生菌组及模型组C-反应蛋白浓度与空白组相比显著升高(P0.01),与模型组相比,益生菌组C-反应蛋白浓度明显降低(P0.01);(4)与空白组相比,模型组血清淀粉酶浓度显著升高(P0.01);与模型组相比,益生菌组血清淀粉酶浓度明显降低,差异有显著统计学意义(P0.01);(5)模型组与空白组相比血清胃动素浓度明显降低(P0.01),与模型组相比,益生菌组血清胃动素浓度明显升高(P0.05);(6)与空白组相比,模型组血清胃泌素浓度显著升高(P0.05),与模型组相比,益生菌组血清胃泌素浓度明显降低(P0.05);(7)与空白组相比,益生菌组及模型组血清二胺氧化酶浓度显著升高(P0.05),与模型组相比,益生菌组血清二胺氧化酶浓度明显降低(P0.05);(8)益生菌组及模型组D-乳酸浓度与空白组相比明显升高,差异有显著统计学意义(P0.01);与模型组相比,益生菌组D-乳酸浓度显著降低(P0.01)。结论:(1)双歧杆菌四联活菌片可减轻SAP大鼠病理损伤及炎症反应,起到保护胰腺组织作用;(2)益生菌组大鼠MLT浓度高于模型组大鼠,GAS浓度低于模型组大鼠,考虑双歧杆菌四联活菌片可改善SAP大鼠胃肠功能,其机制与调节MLT、GAS分泌有关;(3)益生菌组大鼠DAO、D-LA浓度低于模型组大鼠,考虑双歧杆菌四联活菌对SAP大鼠肠屏障功能具有保护作用。