青蒿素对三甲基氯化锡诱导的小鼠海马损伤的作用研究

作     者：高于婷 

作者单位：湖北科技学院 

学位级别：硕士

导师姓名：蔡飞;陈勇

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：青蒿素 三甲基氯化锡 PK2 神经炎症 突触损伤 

摘      要：研究目的:本研究旨在探讨青蒿素(Artemisinin,ARS)是否可以缓解三甲基氯化锡(Trimethyltin chlorid,TMT)诱导的神经毒性以及PK2/PKRs相关信号通路在其中是否发挥一定作用。研究方法:将60只雄性Balb/c小鼠分为Con组、TMT组、TMT+ARS组、ARS组。TMT组小鼠一次性注射TMT,药物组腹腔注射4周的ARS。采用免疫组化评估PK2相关蛋白在小鼠海马中的表达情况。采用网络药理学预测ARS治疗TMT所致的神经损伤的潜在机制。使用行为学评分对小鼠的神经行为进行相关评价。HE、Nissl及电镜评价海马组织病理损伤情况。Western Blotting检测PSD95、SYN1、Synaptophysin、NF-κB p65、TNF-α、PK2、PKR1、PKR2的表达情况。研究结果:免疫组化结果显示,与Con组相比,TMT组小鼠海马CA2和CA3区的PK2和PKR2蛋白表达升高,PKR1蛋白无明显改变;网络药理学结果表明PK2可与ARS、中枢神经损伤及TMT的交集靶点相互作用;行为学评分显示,与Con组相比,TMT组小鼠癫痫评分和中毒症状评分显著升高,而给ARS之后行为学评分明显降低;HE和Nissl染色结果显示,与Con组相比,TMT组小鼠海马CA3和DG区神经元出现嗜酸性细胞质、细胞核深染和核溶解,与TMT组相比,TMT+ARS组小鼠海马神经元损伤程度减轻;电镜结果显示,与Con组相比,TMT组小鼠海马神经元线粒体出现肿胀空泡,粗面内质网出现脱颗粒,给ARS之后上述现象明显逆转;Western Blotting结果显示,TMT组PSD95、SYN1和Synaptophysin蛋白表达比Con组明显降低,TNF-α、NF-κB p65、PK2和PKR2蛋白表达比Con组显著升高,而PKR1蛋白表达无明显改变,与TMT组相比,TMT+ARS组PSD95、SYN1和Synaptophysin蛋白表达明显升高,TNF-α、NF-κB p65、PK2和PKR2蛋白表达显著下降,PKR1蛋白无明显改变。研究结论:TMT会导致小鼠海马CA2和CA3区的PK2和PKR2蛋白表达增加;ARS改善TMT引起的小鼠海马超微结构异常,缓解海马神经元损伤;ARS主要通过调节NF-κB-PK2/PKRs相关炎症通路来缓解TMT所致的神经损伤。