黄芩苷镁对脂多糖诱导大鼠抑郁模型的调节作用及机制

作     者：沈诗嫄 

作者单位：承德医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：刘翠哲;刘金霞

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：黄芩苷镁 抑郁症 神经炎症 氧化应激 脂多糖 TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路 

摘      要：抑郁症是由遗传、生物、心理及环境等多种原因引起的精神疾病,主要症状为持续情绪低落、思维迟缓和意志活动减退。目前传统的抗抑郁药虽有一定疗效,但药物发挥作用时间长,且需要持续服用,副作用较大。因此,寻找安全有效的抗抑郁药物成为抑郁症治疗的研究热点。黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)为临床常用中药,具有抗炎、抗氧化、神经保护和免疫调节等多种药理作用。黄芩苷是黄芩的主要有效成分,大量研究证实,黄芩苷对阿尔茨海默病、帕金森病、癫痫及抑郁症等神经系统疾病模型具有明显的神经保护作用。课题组前期研究发现黄芩苷在药材中以镁盐的形式存在(即黄芩苷镁),黄芩苷镁是否具有神经保护作用目前尚不清楚。因此本研究拟探讨黄芩苷镁对脂多糖(LPS)诱导大鼠抑郁模型的调节作用及机制。目的:本研究通过腹腔注射LPS建立大鼠抑郁模型,应用行为学、病理学和分子生物学技术研究黄芩苷镁对LPS诱导大鼠抑郁模型的调节作用及机制,为黄芩苷镁作为抗抑郁药的研发提供理论和实验依据。方法:1.利用LPS诱导建立大鼠抑郁模型。雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为6组,即对照组、模型组、黄芩苷镁低剂量组(50 mg·kg)、黄芩苷镁高剂量组(150 mg·kg)、黄芩苷组(146.4 mg·kg)和硫酸镁(Mg SO)组(19.7 mg·kg),每组8只,黄芩苷组的剂量与黄芩苷镁高剂量组中的黄芩苷母核等摩尔数,Mg SO组的剂量与黄芩苷镁高剂量组中的镁离子等摩尔数。每日尾静脉注射给药1次,连续给药7天。给药第5天时,开始腹腔注射LPS(1 mg·kg),持续3天,每天1次。实验前(第0天)及第7天给药结束后进行行为学实验,包括旷场实验(OFT)、强迫游泳实验(FST)和糖水偏爱实验(SPT)。实验期间,每天同一时间记录大鼠的体重,观察大鼠精神状态,如毛色、体型、运动活力和接近反应能力等,第7天行为学实验结束后进行标本的采集及处理。2.苏木精-伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察大鼠海马组织神经元形态变化。试剂盒检测海马及皮层组织丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性及血清中白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量。蛋白免疫印迹法(western blot)检测海马核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)p65和磷酸化NF-κB(p-NF-κB)p65的蛋白表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测海马及皮层组织IL-1β和TNF-α的基因表达。结果:1.实验第0天各组大鼠体重及行为学指标无明显差别(P0.05)。连续3天腹腔注射LPS后,与对照组相比,模型组大鼠体重大幅减轻,FST不动时间延长,OFT中心停留时间、清洁动作次数和糖水消耗减少,糖水偏爱率降低,抑郁行为显著(P0.05),黄芩苷镁高剂量组大鼠海马CA1区神经元数量增加明显,排列整齐,染色清晰,尼氏小体数量较多。3.氧化应激及炎症因子结果显示,与对照组相比,模型组大鼠血清IL-6,IL-1β和TNF-α水平显著升高,IL-10降低(P0.05),黄芩苷镁高剂量组作用更为显著(P0.05),黄芩苷镁高剂量组作用更为显著(P0.01)。***-time PCR结果显示,模型组海马及皮层IL-1β和TNF-αm RNA表达量较对照组明显