通督醒神针刺对MCAO/R大鼠学习记忆能力、AMPA受体及其辅助蛋白TARP的影响

作     者：李琪 

作者单位：河南中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：冯晓东

授予年度：2022年

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

主      题：通督醒神针刺 神庭 百会 脑缺血再灌注 学习记忆障碍 突触可塑性 AMPA受体 TARP 

摘      要：目的:探究通督醒神针刺是否通过调节海马组织中α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(anti-α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolipropionic acid,AMPA)受体亚基Glu R1、Glu R2、Glu R3及跨膜AMPA受体调节蛋白(transmembrane AMPA receptor regulatory proteins,TARP)TARPγ2、TARPγ8的表达,促进海马突触可塑性,改善缺血再灌注大鼠(middle cerebral artery occlusion and reperfusion,MCAO/R)学习记忆障碍,为通督醒神针刺这一治疗方法提供理论依据。方法:将70只体重260±20g的SPF级6-8周龄健康雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组和造模组,造模组大鼠采用线栓法制备左侧大脑中动脉栓塞再灌注模型,术后经行为学筛选出学习记忆障碍的大鼠,随机分为模型组和电针组。予电针组大鼠通督醒神针刺法,电针“神庭、“百会穴(疏密波,频率2/100 Hz,电流强度1m A),30min/次,1次/d,持续2周。其余各组除同等条件下抓握外不予其他干预措施。治疗结束前后通过神经功能缺损评分观察大鼠神经功能缺损症状,Morris水迷宫实验检测大鼠认知行为变化,治疗结束后采用TTC染色法观察大鼠的脑梗死体积变化,应用高尔基染色法观察海马CA1区神经元形态及树突棘密度改变,并通过实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马组织中AMPA受体亚基Glu R1、Glu R2、Glu R3的m RNA水平,蛋白质免疫印迹检测大鼠海马组织中AMPA受体亚基Glu R1、Glu R2、Glu R3及跨膜AMPA受体调节蛋白TARPγ2、TARPγ8的蛋白表达。结果:1.Zea-Longa评分:在造模后2 h、治疗第3 d、第7 d、第14 d进行Zea-Longa评分,结果显示各个时间点假手术组与空白组大鼠的Zea-Longa评分均无统计学差异(P0.05);造模后2 h模型组和电针组均表现出神经功能缺损症状;造模后2 h、治疗第3 d、第7 d、第14 d模型组大鼠Zea-Longa评分较假手术组明显升高(P0.05);模型组大鼠逃避潜伏期和总路程较假手术组明显延长(P0.05);模型组大鼠穿越平台次数较假手术组明显减少(P0.05);模型组大鼠脑梗死体积较假手术组明显增加(P0.05);模型组海马组织中AMPA受体亚基Glu R1、Glu R2、Glu R3的m RNA水平均较假手术组降低(P0.05);模型组海马组织中AMPA受体亚基Glu R1、Glu R2、Glu R3及其辅助蛋白TARPγ2、TARPγ8的蛋白表达量较假手术组降低(P0.05);电针组海马组织中AMPA受体亚基Glu R1、Glu R2、Glu R3及其辅助蛋白TARPγ2、TARPγ8的蛋白表达量较模型组增高(P0.05)。结论:通督醒神针刺可减轻MCAO/R大鼠神经功能缺损症状,改善学习记忆功能,作用机制可能与上调AMPA受体Glu R1、Glu R2、Glu R3及其辅助亚单位TARPγ2、TARPγ8的表达,增强海马突触可塑性有关。