肠道菌群对小鼠神经胶质瘤生长及肿瘤微环境Foxp3影响分析

作     者：范仪圻 

作者单位：南方医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：贺帅

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：胶质瘤 肠道菌群 肿瘤微环境 抗生素 菌群定植 

摘      要：背景胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤,恶性程度高,预后差。肠道菌群由不同性质和功能的微生物组成,在人类生理学和生物学活动中具有重要作用。宿主和微生物之间通过肠-脑轴与大脑相互联系,对部分中枢神经系统疾病与恶性肿瘤均有一定影响,但肠道菌群与胶质瘤进展之间相互作用关系尚不明确。探究肠道菌群与胶质瘤进展相关性,阐述二者相互作用关系,有助于胶质瘤辅助治疗手段的开发,为胶质瘤临床治疗提供新思路。目的(1)探讨胶质瘤生长对小鼠肠道菌群的影响;(2)研究肠道菌群失调对胶质瘤生长及其微环境免疫因子的影响;(3)评价肠道菌群稳态环境在胶质瘤生长过程中的作用。方法(1)胶质瘤对肠道菌群影响:C57BL/6小鼠大脑植入GL261-Luc细胞,肿瘤植入前、肿瘤生长第14天及21天采集小鼠粪便样本,16S rDNA测序分析肠道菌群。(2)肠道菌群失调对胶质瘤进展影响:部分C57BL/6小鼠饮用水中添加氨苄西林、万古霉素、新霉素及甲硝唑,其余小鼠给予正常饮用水。给药第7天小鼠大脑植入GL261-Luc细胞,活体成像监测肿瘤生长。肿瘤植入前及肿瘤生长第21天采集粪便样本,16S rDNA测序分析肠道菌群。免疫组化检测小鼠脑组织中CD8与Foxp3表达。(3)肠道菌群稳态对胶质瘤进展影响:C57BL/6小鼠饮用水添加等量复合抗生素,7天后更换正常饮用水。平衡肠道菌群24h后将健康小鼠粪便移植入部分接受抗生素处理的C57BL/6小鼠中,采集小鼠粪便样本,16S rDNA测序分析肠道菌群。24h后小鼠大脑植入GL261-Luc细胞,活体成像监测肿瘤生长。免疫组化检测小鼠脑组织中CD8与Foxp3表达。结果(1)小鼠肠道菌群中Bacteroidia(拟杆菌门)丰度随胶质瘤生长而下降,Firmicutes(厚壁菌门)丰度随胶质瘤发展逐渐升高。(2)肿瘤细胞植入前,接受与未接受抗生素处理组小鼠肠道菌群结构具有显著差异(p0.05)。肿瘤植入后,抗生素处理组小鼠肿瘤生长速度显著大于未接受抗生素处理组(p=0.000)。肿瘤生长21天,接受与未接受抗生素处理组小鼠脑部CD8表达水平无显著差异,接受抗生素处理组小鼠脑部Foxp3表达水平下降。(3)肿瘤细胞植入前,接受与未接受粪便移植组小鼠肠道菌群结构具有显著性差异(p0.05)。肿瘤植入后,粪便移植组小鼠肿瘤发展速度明显小于未接受粪便移植组小鼠(p=0.018)。肿瘤生长21天后,接受与未接受粪便移植的两组小鼠脑部CD8表达水平无显著差异,接受粪便移植组小鼠脑部Foxp3表达水平上调。结论(1)胶质瘤发展诱导肠道菌群结构改变。(2)肠道菌群可影响胶质瘤生长并调节肿瘤微环境Foxp3表达。(3)Bacteroidia(拟杆菌门)丰度可能影响胶质瘤生长。