电针百会穴对脾虚泄泻模型大鼠治疗作用及其机理研究

作     者：周轲 

作者单位：甘肃农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：魏彦明

授予年度：2022年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：电针 百会穴 脾虚泄泻 卡尔哈间质细胞 自噬 

摘      要：动物百会穴具有治疗二便不利、后肢瘫痪、子宫脱垂、泄泻等作用。兽医临床却鲜见关于针刺百会穴治疗泄泻的报道,且作用机制不完全清楚。脾虚泄泻是兽医临床泄泻常见的证型之一。为研究动物百会穴对脾虚泄泻的疗效及机制,本试验通过建立脾虚泄泻大鼠模型,采用电针百会穴进行治疗。在疗效评价的基础上,从肠动力角度深入探究其治疗作用机制。为百会穴治疗动物脾虚泄泻的作用及临床应用提供了治疗手段和理论依据。本文要研究方法和结果如下:选取64只Wistar大鼠,分成假手术组(Sham operated group,Sham),模型组(Model group,Model),电针百会穴组(Electric acupuncture Baihui group,Baihui)和阳性对照组(Positive control group,PC)。采用灌胃苦寒泻下药番泻叶浸液的方法建立脾虚泄泻模型。通过观测各组大鼠一般行为学、体重、脾脏/胰腺脏器指数、脾脏和结肠组织病理学变化。对血常规和血液白介素2(IL-2)、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及分泌性免疫球蛋白A(s Ig A)进行检测分析,评价电针百会穴对脾虚泄泻大鼠模型的治疗效果。结果显示,模型组大鼠体型消瘦,神情呆滞,被毛杂乱,不愿走动,排水样稀便,稀便通常粘附于肛周及尾巴。电针百会穴可逐渐恢复大鼠的一般行为状态,提高脾虚雄性大鼠体重(P0.05);降低脾虚大鼠的腹泻指数(P0.05);降低脾脏指数(P0.01),升高胰腺指数(P0.05);结肠及脾脏组织病变减轻接近假手术组;提升了血液中血红蛋白(HGB)的含量及红细胞压积(HCT)的比例(P0.01);降低血清中IL-2、IL-12、TNF-α含量(P0.05);升高s Ig A的含量(P0.01)。表明电针百会穴可缓解其脾虚泄泻症状、修复肠道组织损伤、减轻机体的炎症反应及调节机体的免疫能力,对脾虚泄泻大鼠有较好的治疗效果。为深入探究电针百会穴对脾虚泄泻大鼠的治疗作用机制,从肠动力角度展开了研究。检测了各组大鼠的小肠墨汁推进率、血清D-木糖及淀粉酶(AMS)、胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)、生长抑制素(SS);通过蛋白免疫印迹法(WB)进一步检测了肠道起搏细胞卡尔哈间质细胞(ICC)及ICC自噬相关蛋白c-kit、SCF、Cx43、LC3、p62、Beclin1等。结果发现,与模型组相比电针脾虚泄泻大鼠百会穴有降低小肠墨汁推进率的趋势,可升高血清中D-木糖及AMS含量(P0.05);升高VIP和SS含量(P0.05),降低MLT含量(P0.05);可降低脾虚泄泻大鼠结肠中c-kit及SCF蛋白相对表达量(P0.05);降低Cx43蛋白相对表达量(P0.05);提升LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例(P0.01),降低p62蛋白相对表达量(P0.01),提升Beclin1蛋白相对表达量(P0.01)。表明电针百会穴可以减缓脾虚泄泻大鼠的肠道运动,促进肠吸收;通过调节细胞自噬,调控ICC,缓解胃肠慢波的释放,达到治疗脾虚泄泻的目的。综上电针百会穴对脾虚泄泻大鼠治疗效果确实,电针百会穴可以通过调控ICC数目达到治疗目的。