巨噬细胞Men1敲除促进肿瘤恶性表型及其机制探究

作     者：周佳利 

作者单位：厦门大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐斌

授予年度：2020年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：Men1 MLL 巨噬细胞 肺腺癌 肝细胞肝癌 

摘      要：肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)是指肿瘤细胞生长的局部环境,即包括肿瘤细胞本身,还包括与肿瘤密切相关的免疫细胞(如:巨噬细胞、T细胞)、成纤维细胞、内皮细胞等各种细胞,以及各种免疫和炎症细胞因子、微血管、胞外基质(ECM)等。TME在肿瘤的发生、发展及转移过程中起到重要的调节作用。巨噬细胞是肿瘤微环境中数量最丰富的免疫细胞,对肿瘤具有双重调控作用,参与调控肿瘤微环境的抗肿瘤免疫应答及肿瘤的免疫逃逸,但其作用机制不清有待深入研究。MEN1(小鼠为Men1)基因是多发性内分泌肿瘤1型(MEN1)综合症的关键致病基因,编码610个氨基酸的蛋白质menin。课题组前期研究发现menin-MLL组蛋白甲基转移酶复合物在肺癌及肝癌中均起到关键的调控作用,是肺癌/肝癌关键的调控因子;并揭示了其表观遗传调控特性的多样性;而且,鉴定了menin参与单核-巨噬细胞分化的染色质重塑机制,提示巨噬细胞中Men1的潜在生物学功能。本研究聚焦“巨噬细胞中Men1调控肿瘤恶性表型的生物学功能和机制这一科学问题,利用单核/巨噬细胞特异性敲除Men1的Men1f/f;Lyz2-cre小鼠及单核/巨噬细胞特异性敲除MLL的MLLf/f;Lyz2-cre基因工程小鼠,建立化学药物DEN诱导的原发性肺癌/肝癌肿瘤模型。研究发现:(1)Men1敲除显著增加肺腺癌/肝细胞肝癌恶性表型,提示巨噬细胞中Men1的抑癌生物学功能;(2)Men1敲除影响肿瘤微环境中巨噬细胞、成纤维细胞及CD8+T细胞的浸润,与肿瘤外包裹层相关;(3)MLL敲除降低了 DEN诱导的肿瘤恶性表型,特别是雄性小鼠的肝细胞肝癌表型,提示巨噬细胞中Men1敲除促进肿瘤的恶性表型并不依赖MLL;(4)腹腔巨噬细胞RNA-seq筛选鉴定Men1的下游靶基因调控网络,功能富集分析分析鉴定出具有显著差异的淋巴细胞趋化性、细胞因子响应等基因群。综上所述:本研究证明了巨噬细胞中Men1的抑癌生物学功能,并鉴定了其病理学机制;阐明了Men1的抑癌生物学功能不依赖于MLL;鉴定了巨噬细胞中Men1和MLL的下游靶基因网络。为进一步精确揭示巨噬细胞中Men1调控肿瘤恶性表型的分子机制奠定了坚实基础,为肿瘤免疫治疗提供了新的思路。