北美红杉叶片多糖提取、分离纯化、结构鉴定及生物活性研究

作     者：刘保山 

作者单位：湖北民族大学 

学位级别：硕士

导师姓名：肖强

授予年度：2022年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：多糖 北美红杉 分离 纯化 结构鉴定 抗肿瘤功能 

摘      要：多糖是一种具有多种生物活性的生物大分子,生物活性在一定程度上取决于其内部结构,其提取率的高低受到提取过程中的多种因素的共同作用,探究其提取、分离纯化工艺,可以更加高效地获取较纯的多糖,测定其生物活性可为后续的开发提供参考价值。本文以北美红杉叶片为材料,探究纤维素酶浓度、超声pH、超声温度、超声时间四个因素对提取率的影响,比较多种分离纯化方法,初步探究其结构并测定其多种生物活性,以期探究北美红杉叶片多糖的作用机制,提高北美红杉的价值,为后续开发提供一定的理论依据。主要结果如下:1.北美红杉叶片多糖最优提取条件为:酶浓度2%,超声pH5.0,超声时间13 min,超声温度52℃,在此条件下多糖的提取率为4.39%;2.多种脱蛋白方法中,酶-TCA法效果最好,蛋白脱除率和多糖保留率分别为68.48%和65.76%;3.经DEAE-52和葡聚糖凝胶G-100层析分离得到北美红杉叶片精多糖的单糖组成为甘露糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:岩藻糖=8.15:19.62:33.63:24.41:14.2,主要单糖为半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖;4.北美红杉叶片多糖具有一定的抗氧化活性;5.北美红杉叶片多糖通过上调A549细胞活性氧表达水平,促进了A549细胞的凋亡,对A549细胞的迁移能力产生抑制作用。