CUL4A在食管鳞癌中的表达特点及其对TE-1细胞生物学特性的影响

作     者：李家隆 

作者单位：宁夏医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：朱自江

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：CUL4A 食管鳞癌 表达 侵袭迁移增殖 

摘      要：目的初步探究CUL4A与食管鳞癌患者临床病理资料的相关性,随后通过si RNA转染技术降低CUL4A蛋白表达水平后分析其对TE-1细胞生物学特性的影响。方法1.收集符合标准的组织样本,采用实时荧光定量PCR以及免疫组织化学方法研究了116例原发性食管鳞状细胞癌（ESCC）组织标本中CUL4A的表达情况,并探讨其临床相关性和预后价值。2.通过siRNA介导的基因沉默技术转染TE-1细胞使得CUL4A表达下调,并运用免疫印迹法检测CUL4A蛋白表达水平,最后使用划痕实验、CCK-8、Transwell实验进一步评估其对TE-1细胞的迁移、增殖、侵袭的能力影响。结果***4A mRNA表达水平于正常食管组织、癌旁组织与食管鳞癌组织呈增高趋势,结果有明显差异（P0.05）。此外,通过对比分析患者临床资料发现,CUL4A mRNA及其相应蛋白的表达与ESCC患者的性别、年龄、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移无统计学差异,与肿瘤浸润深度和远端转移显著相关并有统计学差异（P0.05）。CUL4A蛋白阳性表达的患者对比阴性表达患者预后更差（P0.05）。2.体外实验发现,通过脂质体转染CUL4A-siRNA进入食管鳞癌TE-1细胞,经由Western blot实验提示转染CUL4A-si RNA后CUL4A蛋白表达明显减少（P0.05）。划痕实验48小时后最终迁移距离CUL4A-si RNA组（116.4±9.1μm）相比于对照si-RNA组（201.7±21.2μm）和空白对照组（226.3±23.7μm）明显降低（P0.05）;Transwell实验结果提示CUL4A-si RNA组侵袭迁移个数（61±6.81）相较于对照si-RNA组侵袭迁移个数（143±11.36）和空白对照组（162±10.47）减少（P0.05）;CCK-8实验可见CUL4A-si RNA组增殖能力较另两组有明显减弱（P0.05）。结论***4A表达水平与食管鳞癌患者临床病理资料密切相关且对预后评估有参考价值。2.体外实验表明,CUL4A表达下调可见食管鳞癌TE-1细胞增殖、侵袭、迁移受到抑制。***4A有作为食管鳞癌诊断肿瘤标志物、预后评估可用标志物的巨大潜力,并且有望成为食管鳞癌抗癌治疗靶点。