应用补脾益肾法干预糖尿病大鼠的骨微结构特点研究

作     者：高城翰 

作者单位：辽宁中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：关雪峰

授予年度：2022年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：补脾益肾 Micro-CT 糖尿病性骨质疏松症 Meta分析 

摘      要：背景:糖尿病性骨质疏松症是一种缓慢发展的代谢性骨病,以骨质量低、骨微结构破坏为特征,常伴有骨吸收增多、骨形成减少,临床上表现为骨脆性增加、易骨折。常用药物如双磷酸盐类等存在药物假期和不良反应的使用限制。应用补脾益肾法防治糖尿病性骨质疏松症在临床上具有潜在优势,但缺乏循证医学证据,其作用机制仍有待探究。目的:本研究首先用Meta分析的方法评价补脾益肾法治疗糖尿病性骨质疏松症的疗效和安全性,其次应用Micro-CT方法研究补脾益肾法对糖尿病大鼠股骨骨微结构形态的影响,为中医药防治糖尿病性骨质疏松症提供科学依据。材料与方法:1用荟萃分析的方法评价补脾益肾法治疗糖尿病性骨质疏松症的疗效和安全性。2应用补脾益肾法干预糖尿病大鼠的骨微结构特点研究2.1应用SPF级雄性8周龄SD大鼠80只,经过1周的适应性喂养后,随机分为正常对照组20只,造模组60只。正常对照组喂养普通饲料,造模组喂养高脂高糖饲料。2.2分别喂养4周后,将造模组大鼠进行单次腹腔注射1%STZ溶液(40mg/kg),正常对照组给予等量柠檬酸盐缓冲液。72小时后,尾部静脉取血测量随机血糖值≥16.7mmol/L,提示糖尿病模型造模成功。2.3造模组模型成功后随机分为模型组、渴洛欣组和补脾益肾组。正常对照组和模型组使用10ml/kg生理盐水予日1次灌胃,渴洛欣组用渴洛欣悬浊液12ml/kg日1次灌胃,补脾益肾组用补脾益肾方悬浊液13.34ml/kg日1次灌胃。2.4干预6周后每组随机取4只摘取左侧股骨,使用显微计算机断层扫描(micro-CT)检测样本的骨微结构,扫描完成后,选取股骨颈近端膨大区域作为感兴趣区(ROI),设定三维重建阈值后对各标本ROI行重建,利用机载软件,结合医学统计学进行分析。干预12周后将其余实验模型进行相同取材以及实验方法。结果:1本研究共纳入10项RCT研究,与对照组相比,实验组治疗有效率、中医证候积分、骨密度、空腹血糖、餐后2小时血糖、糖化血红蛋白具有统计学意义;而骨代谢指标血钙、血磷、碱性磷酸酶均无统计学差异。2干预12周后,补脾益肾组股骨的全骨骨密度、骨表面积、骨表面积组织量比、骨表面积骨量比、骨小梁骨密度、骨皮质骨密度均优于模型组,补脾益肾组股骨BMD、BS、BS/TV、BS/BV、Tb.BMD、CMD指标改变与模型组比差异有统计学意义(P=0.015、P=0.043、P=0.039、P=0.002、P=0.041、P=0.009)。而干预6周时无统计学意义(P0.05)。从Micro-CT三维重建图的结果看,12周样本与6周样本相比,模型组股骨颈近端骨小梁数量稀疏、间隙变大,骨小梁结构的完整性被破坏,呈进行性杆化趋势,杆状结构增多,皮质骨薄且边缘不平整;而12周补脾益肾组样本股骨颈近端骨小梁数量较多,退变减缓,皮质骨较模型组厚且清晰平整。结论:补脾益肾法治疗糖尿病性骨质疏松症具备安全性和有效性;该法能够对糖尿病大鼠的骨微结构形态的产生积极影响,可使大鼠再建成骨破骨平衡、防止骨小梁结构杆化。