蒙医灸疗法对衰老模型大鼠相关转录组的影响

作     者：乌日力嘎 

作者单位：内蒙古民族大学 

学位级别：硕士

导师姓名：斯钦图

授予年度：2022年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100513[医学-民族医学(含：藏医学、蒙医学等)] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：蒙医灸疗法 抗衰老 转录组学 ALISA试剂 

摘      要：目的:观察蒙医灸疗法对衰老模型大鼠顶会穴、肾穴施灸后的体重、学习及记忆力、脾脏及胸腺指数、SOD、CAT、MDA指数、相关转录组表达的影响,进一步阐明蒙医灸疗法对衰老模型大鼠相关机制,并为蒙医灸疗法抗衰老临床提供客观依据。方法:50只纯种SD大鼠随机分为正常组、模型组和灸疗组（顶会穴、肾穴、顶会+肾穴灸疗组）等五组。模型组和灸疗组大鼠颈部皮下注射5%D-半乳糖,连续42天,每日1次。正常组每日一次向颈部皮下注射等量的0.9%生理盐水,持续42天。造模期间,每周测量并记录每只大鼠的体重,再根据体重变化重新计算每只大鼠的给药剂量。正常组和模型组正常饲养。灸疗组造模后隔一周开始施灸,隔一天灸一次,共21次。行为学测试:（1）每周测量一次体重,记录体重变化。（2）迷宫实验检测各组大鼠学习记忆功能的变化。（3）行游泳实验,检测大鼠体力变化。实验毕,所有大鼠均腹腔注射70%水合氯醛麻醉,切除海马、肾脏、脾脏、胸腺和分离血清。测出衰老相关酶指标:MDA、CAT、SOD;计算脾脏和胸腺指数;海马和肾脏在-80℃冷冻柜冷冻,做转录组测序。结果:灸疗法对衰老模型大鼠体重的影响:顶会穴组、肾穴组、顶会+肾穴组与模型对照组比较有显著性差异（P0.01）。灸疗法对衰老模型大鼠行为指标的影响:（1）灸疗法对学习能力的影响:顶会组、肾穴组、顶会+肾穴组与模型组比较有显著差异（P0.01）;（2）灸疗法对衰老模型大鼠记忆能力的影响:顶会组、肾穴组、顶会+肾穴组与模型组比较有显著性差异（P0.01）（3）灸疗法对衰老模型大鼠血清指标的影响:（1）灸疗法对CAT含量的影响:顶会穴组肾穴组与模型组比较有显著性差异（P0.01）。（2）灸疗法对MDA含量的影响:顶会穴组、肾穴组与模型组比较有显著性差异（P0.01）。（3）灸疗法对SOD活性的影响:顶会穴组、肾穴组与模型组比较有显著性差异（P0.01）。通过对199个基因的1og2F ol d Change进行聚类分析,发现C4b普适存在三种组织cluster1中,这一点在其他衰老相关转录组测序数据中也得到论证。为获得组织特异性显著变化基因,我们对cluster1按照1og2 Fold Changelog（1.5）,或1og2 Fold Changelog2（0.75）条件进一步筛选,发现海马有6个基因,肾脏有31个基因呈线性或近似线性变化。结论:1.本实验造模成功,5%D-半乳糖衰老模型适用于蒙医灸疗法抗衰老配伍规律实验研究。2.证明了蒙医灸疗法利用转录组及其信号通路来进行抗衰老目的。3.蒙医灸疗法可通过影响衰老模型大鼠的相关酶（SOD、MDA、CAT）、脾脏及胸腺指数、体重、体力、学习记忆能力等来达到抗衰老的目的。