二甲双胍对TGF-β2诱导的人晶状体上皮细胞增殖、迁移及上皮-间质转分化的作用研究

作     者：张昀昀 

作者单位：桂林医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：丁芝祥

授予年度：2022年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：二甲双胍 上皮-间质转分化 细胞增殖 细胞迁移 Hippo信号通路 

摘      要：目的:研究二甲双胍对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的人晶状体上皮细胞增殖、迁移及上皮-间质转分化(EMT)的影响,并初步探讨其机制。方法:选择人晶状体上皮细胞(LECs)HLEB-3,根据处理条件不同分成对照组和实验组,TGF-β处理HLEB-3 24 h作为对照组;在TGF-β处理前提下加入不同浓度二甲双胍作为实验组;采用CCK8法检测不同浓度二甲双胍(10、15、20、25 mmol/L)在不同时间点(24、48、72 h)各组细胞的增殖水平;应用细胞划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;使用Western blotting检测各组细胞中的辅助激活因子Yes相关蛋白1(Yes-associated protein,YAP1)、大肿瘤抑制因子1(large tumor suppressor 1,LATS1)和波型蛋白(Vimentin)的表达;使用RT-q PCR法检测YAP1、LATS1、哺乳动物STE20样激酶1(mammalian sterile 20-like kinase,MST1)、Vimentin、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的m RNA表达水平。结果:细胞增殖检测结果表明,与对照组相比,不同浓度二甲双胍组的细胞增殖水平均明显降低(P0.05),且呈剂量依赖性;划痕实验结果显示,与对照组比较,加入二甲双胍组宽带明显增加(P0.05)。Western blotting结果显示,与对照组比较,YAP1和Vimentin表达水平降低,LATS1表达水平增高(P0.05)。RT-q PCR结果证明,与对照组比较,YAP1和Vimentin表达水平降低,LATS1、MST1、E-cadherin表达水平增高(P0.05)。结论:二甲双胍可以抑制TGF-β诱导的人晶状体增殖、迁移及上皮-间质转分化,其作用机制可能与Hippo信号通路的激活有关。