宁夏欧李4号对小鼠骨质疏松的影响研究

作     者：徐潇吟 

作者单位：宁夏大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张惠玲

授予年度：2022年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：欧李 骨质疏松 转录组 果浆 

摘      要：欧李风味口感独特,富含大量多酚、氨基酸、矿物质等,营养保健价值非常高,特别是含大量的水溶性钙,容易被人体吸收,是食补钙的最佳食品,对改善骨质疏松具有促进作用,引起了很多研究者的关注。本实验以欧李4号为原料,通过动物实验和生物信息学分析探究其对小鼠骨质疏松的改善作用和影响机理,并开发了一款欧李果浆产品。具体实验结果如下:1、欧李对改善小鼠骨质疏松的影响:将60只雌性ICR小鼠随机平均分为6组:正常组、模型组、阳性对照组、欧李低剂量组、欧李中剂量组、欧李高剂量组。除正常组灌胃相同体积生理盐水,其他组连续灌胃维甲酸（84 mg/kg·bw）14天构建骨质疏松小鼠模型。建模成功后,阳性对照组灌胃阿仑膦酸钠（Alendronate Sodium,ALN）,欧李低、中、高剂量组分别灌胃欧李8 ml/kg、10 ml/kg、12 ml/kg,正常组和模型组灌胃生理盐水10 ml/kg,实验一共持续10周,然后检测小鼠血清钙和血清磷的含量、抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate resistant acid phosphatase,TRA P）和碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）的变化情况并对小鼠股骨进行Micro-CT扫描和HE染色。结果显示:与正常组相比,模型组小鼠血清钙、血清磷含量、TRAP值显著上升（P≤0.05）,ALP值显著下降（P≤0.05）,小鼠骨密度显著下降（P≤0.05）,模型组小鼠骨小梁空间结构明显破坏,表明建模成功。而欧李低、中、高剂量组血清钙、血清磷含量、TRAP值与模型组相比,显著下降（P≤0.05）,欧李高剂量组的ALP值较模型组显著上升（P≤0.05）,与阳性对照组相比差异不大,欧李低、中、高剂量组间差异并不显著。Micro-CT扫描结果显示,欧李中剂量组和高剂量组股骨的骨微环境得到明显改善,骨小梁数目、厚度和骨小梁连接数均增加。HE染色结果显示与模型组相比,灌胃欧李的组中骨小梁排列更加完整有序,其中高剂量组骨小梁空白区域明显减少。2、欧李对小鼠骨质疏松影响的转录差异机制研究:采用转录组测序方法,进行生物信息学分析,通过对模型组与正常组、模型组与欧李中剂量组筛选出的差异基因进行GO和KEGG功能富集分析,发现欧李对改善小鼠骨质疏松的影响因素与Bmp1、Il2rb、Col11a2、Col5a2、Alpl等基因密切相关,欧李可能通过信号转导、免疫系统、内分泌系统、脂质代谢等通路共同作用改善小鼠骨质疏松,其中T细胞及其亚群的基因调控或信号转导可能影响最大。3、由于欧李鲜果保存期短,且偏酸偏涩,实验将欧李用木糖醇调糖,用维生素C护色制作成果浆产品,以满足市场需求。最佳配比为:欧李质量分数60%、木糖醇添加量10%、维生素C添加量0.07%,此条件下制作得到的欧李果浆感官评分最高。