基于“气血”理论探讨模拟人体之气的太赫兹波对造血功能及hUC-MSCs活力的影响

作     者：王美君 

作者单位：江西中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张琦

授予年度：2022年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：气 太赫兹波 人脐带间充质干细胞 细胞活力 造血功能 

摘      要：目的:基于中医“气血理论,探索模拟人体之气的太赫兹波对造血功能和人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stemcells,h UC-MSCs)增殖活力的作用,并探究其量效关系。方法:(1)研究一:采用从人脐带中提取后经体外培养的间充质干细胞,将其分为正常组、低强度组、中强度组、高强度组,按照实验分组对细胞进行太赫兹波辐照干预。采用CCK-8检测法测定各组人脐带间充质干细胞细胞生长、增殖变化情况,采用流式细胞术检测各组人脐带间充质干细胞细胞表面标记物CD73、CD45、HLA-DR、CD105的表达率。(2)研究二:采用正交设计实验方法将小鼠随机分为9个组,太赫兹波干预三因素三水平分别为档数(2档即低强度、4档即中强度、6档即高强度)、天数(7天、14天、21天)、时长(15分钟、30分钟、45分钟)。采用太赫兹波三个档位、不同时长、不同天数对小鼠进行全身照射后,采用血细胞分析仪对小鼠血样中白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板进行含量测定,同时计算小鼠胸腺指数和脾脏指数,并取小鼠骨髓测定其单侧骨髓有核细胞数目,观察细胞集落形成能力以评估骨髓功能。结果:(1)研究一:CCK-8检测结果显示低强度组的细胞存活百分比、增值促进率高于中强度组,而高强度组的细胞存活百分比小于低、中强度组,得出结果为抑制率。流式细胞术检测结果显示,人脐带间充质干细胞特殊表面抗原CD73、CD105表达强阳性,而CD45和HLA-DR表达均为阴性,表达均与ISCT准则相符合。经不同强度太赫兹波辐照干预后,低强度太赫兹波可以提高人脐带间充质干细胞CD105、CD45和HLA-DR的阳性表达率(P0.05),差异性不显著。(2)研究二:正交设计方差分析结果显示太赫兹波照射天数对小鼠体内红细胞数、血红蛋白数、骨髓有核细胞数、脾脏指数有显著影响(P0.05);而太赫兹波不同档数(强度)、不同时长、不同天数对白细胞数、血小板数及胸腺指数均无显著影响,差异无统计学意义。正交设计直观分析结果显示太赫兹波2档(低强度)、21天、15分钟干预是增加小鼠红细胞数、血红蛋白数、骨髓有核细胞数的最优选方案,脾脏指数受太赫兹波天数增加而降低,当把脾脏功能作为主要考虑因素时,宜选择的最优选方案应为2档、7天、15分钟。结论:(1)模拟人体之“气的太赫兹波具有类似于“气的推动作用,其作用表现为“激发和促进细胞活力和细胞增殖,“激发和促进小鼠造血功能引起骨髓有核细胞数、红细胞数及血红蛋白数增多即“气生血的作用。(2)太赫兹波模拟人体之气的“推动作用时,太赫兹辐射仪不同参数是其疗效产生差异的关键影响因素。从照射强度分析量效关系,低强度太赫兹波对离体细胞(人脐带间充质干细胞)活力具有提高作用,不同强度对小鼠在体细胞(血细胞)无影响;而从照射天数和时长分析量效关系,21天是增强小鼠造血功能的最优选方案,不同时长无明显影响。