5-ALA光动力疗法对卵巢癌裸鼠移植瘤细胞的杀伤作用研究

作     者：刘南南 

作者单位：山西医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：索玉平

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：5-氨基乙酰丙酸 光动力疗法 杀伤作用 卵巢癌细胞 裸鼠 

摘      要：目的:探究5-ALA光动力疗法（PDT）对卵巢癌裸鼠移植瘤细胞的杀伤作用。方法:建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,分为模型组、5-ALA组、激光照射组、5-ALA-PDT组,每组10只。5-ALA组、5-ALA-PDT组分别予瘤内注射40 mg/kg的5-ALA无菌生理盐水溶液,模型组、激光照射组给予瘤内注射等量生理盐水。4 h避光后,激光照射组、5-ALA-PDT组用630 nm激光治疗仪局部照射瘤体,每次照射20分钟。每隔2 d接受1次,总共5次。治疗完成后测量瘤体体积,脱臼法处死四组小鼠进行解剖,取出肿瘤进行下一步实验。（1）测量移植瘤大小,并绘制肿瘤生长曲线图;（2）计算抑瘤率并绘制柱状图比较;（3）HE染色的组织切片;（4）TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡情况;（5）应用q RT-PCR（实时荧光定量PCR）技术,对cleaved Caspase-3、Bcl-2基因与Bax基因的m RNA进行测定;（6）利用Western blot（免疫印迹法）技术检测cleaved Caspase-3、Bcl-2与Bax的蛋白表达。结果:相比于模型组和5-ALA组,激光照射组与5-ALA-PDT组干预14 d后的瘤体体积均更低,且5-ALA-PDT组的瘤体体积在四组中最低（P0.001）。激光照射组和5-ALA-PDT组治疗7 d、14 d后的抑瘤率均高于模型组和5-ALA组（P0.001）,同时5-ALA-PDT组高于激光照射组（P0.05）。激光照射组和5-ALA-PDT组的组织cleaved Caspase-3与Bax的m RNA表达与蛋白表达均高于模型组和5-ALA组（P0.001）,同时5-ALA-PDT组高于激光照射组（P0.001）;激光照射组和5-ALA-PDT组的组织Bcl-2 m RNA表达与蛋白表达均低于模型组和5-ALA组（P0.001）,同时5-ALA-PDT组低于激光照射组（P0.001）。结论:5-ALA-PDT治疗卵巢癌可通过上调cleaved Caspase-3、Bax表达、抑制Bcl-2表达来增强对诱导肿瘤细胞凋亡,从而增强其杀伤作用。