牛黄清火丸质量标准提升研究

作     者：姜静静 

作者单位：南京中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈民辉

授予年度：2022年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：牛黄清火丸 质量标准 化学成分 鉴别 含量测定 

摘      要：牛黄清火丸是由大黄、黄芩、桔梗、山药、丁香、人工牛黄、冰片、雄黄、薄荷脑九味中药配伍,加炼蜜制成的大蜜丸。其功效为清热、散风、解毒,用于治疗肝、胃、肺蕴热,引起的头晕目眩、口鼻生疮、风火牙痛、咽喉肿痛、痄腮红肿、耳鸣肿痛。其质量标准收载于《卫生部药品标准》第七册（中药成方制剂）及《国家中成药标准汇编》口腔肿瘤儿科分册,标准中的检测内容陈旧、简陋,可控性低。近年来,对于牛黄清火丸的质量研究较少,而其质量标准的更新又较为迫切。因此,本课题对牛黄清火丸的质量标准进行研究,采用 UHPLC-Q-Orbitrap-MS/MS、TLC、HPLC-ICP-MS、HPLC、GC 等技术方法对现行标准进行提升和优化,在研究得到的化学成分谱基础上,建立了牛黄清火丸鉴别项、检查项、含量测定项的质量控制方法,以期为该制剂的标准提升提供参考依据。本论文的研究具体包括:1.牛黄清火丸化学成分谱研究采用UHPLC-Q-Orbitrap-MS/MS对牛黄清火丸的化学成分进行定性鉴定,并将Orbitrap得到的优质的数据通过Compound Discover 3.2（CD）小分子化合物鉴别软件进行分析,共分析鉴定出61个化合物,其中,34个化合物为黄酮类,9个化合物为蒽醌类,4个化合物为香豆素类,9个化合物为有机酸类,5个为其他类,7个化合物已经对照品比对确证。同时,对各类化合物的裂解规律进行研究,并举例列出了代表性化合物的裂解途径。本研究完善了该制剂的化学成分谱信息,为其质量控制水平的提升奠定了基础。2.牛黄清火丸质量标准提升研究基于化学成分谱的研究结果,对牛黄清火丸的鉴别项、检查项、含量测定项进行了质量控制的提升研究。采用薄层鉴别的方法在现行标准的基础上增加了黄芩、桔梗的研究,优化了大黄、丁香的薄层鉴别方法;采用ICP-MS对制剂中总砷及可溶性总砷进行测定;采用HPLC-ICP-MS对制剂中雄黄的毒性成分（三价砷及五价砷）进行限量检查研究,并确定了含三价砷和五价砷的总量以砷（As）计,不得过186.5μg·g-1;采用HPLC双波长切换法同时测定制剂中大黄、黄芩的7种成分,并确定本品含黄芩以黄芩苷、黄芩素计,二者总量不得少于6.2 mg·g-1,含大黄以芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚计,五者总量不得少于0.23 mg·g-1;采用GC法完成薄荷脑、冰片、丁香中挥发性成分的测定方法研究,并确定本品含薄荷脑不得少于0.30 mg·g-1、异龙脑不得少于0.41 mg·g-1、龙脑不得少于0.66 mg·g-1、丁香酚不得少于0.74 mg·g-1。经过方法学考察,均能证实方法的可行性,能够为有效控制产品质量提供技术支持。