虫草素对银屑病样细胞模型干预作用的研究

作     者：梁辉勇 

作者单位：广西中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：苏齐鉴

授予年度：2022年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：虫草素 银屑病 炎症因子 核因子κB 

摘      要：目的:通过银屑病样细胞模型观察虫草素对模型细胞活性、炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-23、IL-17C)m RNA表达和NF-κB信号通路的影响,初步探讨虫草素对银屑病的潜在治疗作用。方法:1.用TNF-α诱导HaCaT细胞构建银屑病样细胞模型,将细胞分为5组,即对照组(Control)、模型组(TNF-α)、虫草素低浓度组(25μmol/L)、虫草素中浓度组(50μmol/L)、虫草素高浓度组(100μmol/L)。2.用细胞迁移实验和CCK-8实验检测虫草素对细胞模型的抑制作用。3.用流式细胞术和荧光染色法检测虫草素诱导细胞凋亡的作用,用流式细胞术检测虫草素对细胞周期的影响。4.用反转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测虫草素干预后模型细胞的TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-23、IL-17C m RNA及NF-κB p65、IκBαm RNA的相对表达。5.用荧光染色的方法检测虫草素干预模型细胞后NF-κB激活-核转运的情况。结果:1.与对照组相比,TNF-α可促进细胞生长,差异有统计学意义(P0.05),40μg/L作用24h可建立较理想的细胞模型。虫草素可抑制HaCaT细胞生长,抑制率与浓度呈依赖性(P0.01),50%抑制浓度(IC)约为85μmol/L。2.虫草素可抑制模型细胞迁移率(P0.01),并呈浓度依赖性地抑制模型细胞的活性(P0.01)。3.虫草素可促进模型细胞凋亡,差异有统计学意义(P0.01)。虫草素对模型细胞未见有明显的周期阻滞。4.虫草素可下调模型细胞TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-23、IL-17C的m RNA表达和NF-κB p65、IκBα的m RNA表达,差异均有统计学意义(P0.05)。5.虫草素可使NF-κB p65核内转移减少。结论:虫草素可抑制银屑病样HaCaT细胞模型活性,促进细胞凋亡,下调炎症细胞因子表达,抑制NF-κB信号通路,提示虫草素可能具有治疗银屑病的潜在价值。