刮痧和放血的不同干预次序对SIRS模型大鼠相关炎性因子影响的研究

作     者：李一纯 

作者单位：福建中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：林丽莉

授予年度：2022年

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

主      题：全身炎症反应综合征 SIRS 刮痧 放血 炎性细胞因子 

摘      要：目的本研究通过制备SIRS模型大鼠,探究刮痧与放血的干预方式对SIRS模型大鼠直肠温度、白细胞计数等一般情况变化及炎性细胞因子含量的影响,以及其对肺功能保护的作用。并且探寻不同干预次序的组合方式,是否会存在效应的差异,以期提供中医体表外治领域的临床干预策略,为SIRS等相关感染性疾病的救治提供新思路和实验基础。方法SPF级Wistar大鼠共64只,依照随机数字表将动物分成空白组、模型组、放血组、刮痧组、刮痧+放血组、放血+刮痧组、放血刮痧同时操作组、乌司他丁组8组。所有大鼠先统一测定直肠温度后开始造模,造模时以500mg/kg剂量的酵母多糖-石蜡油混悬液进行腹腔注射,制备全身炎症反应的SIRS大鼠模型,空白组予以灭菌石蜡对大鼠进行腹腔注射。分别在造模后的2h、24h进行干预,乌司他丁组予以乌司他丁2.7万U/kg进行腹腔注射;放血组取少商穴进行放血;刮痧组取大椎穴、肺俞穴进行刮痧;放血+刮痧组先于造模后2h取少商穴放血,再于造模后24h取大椎穴、肺俞穴进行刮痧;刮痧+放血组先于造模后2h取大椎穴、肺俞穴进行刮痧,再于造模后24h取少商穴放血;放血刮痧同时操作组在造模后的2h、24h均进行少商穴放血和大椎穴、肺俞穴刮痧;空白组与模型组大鼠不做干预,仅模拟抓取动作。同时在造模后2h、24h、48h分别对大鼠体征进行观察记录并测定直肠温度,以及造模后2h、24h通过眼眶静脉丛采血法测定各组大鼠外周血白细胞计数。所有大鼠在造模后的48h进行取材,采用酶联免疫（ELISA）检测各组血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、INF-γ和肺组织中TNF-α、IL-6、IL-10、INF-γ、TGF-β的炎性细胞因子含量;HE病理学染色观察各组肺组织病理变化和肺损伤评分,并对肺组织病理切片进行炎性细胞平均光密度分析。结果1、直肠温度测定结果:在造模后2h,与空白组相比,模型组与干预各组直肠温度显著下降（P0.05）。在造模后24h,与空白组相比,模型组直肠温度明显降低（P0.05）;与模型组相比,放血刮痧同时操作组和放血+刮痧组直肠温度明显上升（P0.05）;且在干预各组间比较中,放血刮痧同时操作组明显高于放血组（P0.05）。在造模后48h,模型组直肠温度仍明显低于空白组（P0.05）;与模型组相比,放血组、放血+刮痧组和刮痧+放血组直肠温度升高（P0.05）。2、白细胞计数检测结果:造模后2h,与空白组相比,造模各组白细胞计数轻度上升,而后出现明显下降的情况。在造模后24h,与空白组相比,模型组白细胞计数明显降低（P0.05）;与模型组相比,放血组和放血+刮痧组白细胞计数升高（P0.05）。3、肺组织病理学观察结果:空白组肺泡结构正常、清晰且完整,无明显病理改变。模型组存在明显的肺组织结构破坏,肺泡壁明显增厚,肺泡腔塌陷、缩小、变狭长,肺间质以炎症改变为主,在肺间质及肺泡腔内明显可见大量炎性细胞浸润,部分肺间质区域有红细胞渗出、充血、水肿、肺实变等病理改变。而干预各组肺组织仍有部分肺泡融合、肺泡壁增厚情况,但已有明显改善,与模型组相比肺泡结构较为明晰,肺泡腔及肺间质仍见有少量炎性细胞聚集。4、肺组织切片炎性细胞平均光密度分析结果:与空白组相比,模型组炎性细胞平均光密度值明显升高（P0.05）。与模型组相比,干预各组炎性细胞平均光密度值明显降低（P0.05）;且放血+刮痧组炎性细胞平均光密度值明显低于乌司他丁组与放血刮痧同时操作组（P0.05）。5、肺组织损伤评分结果:与空白组相比,模型组肺损伤评分明显提高（P0.05）。与模型组相比,放血刮痧同时操作组、放血+刮痧组和刮痧+放血组明显降低（P0.05）。6、大鼠血清ELISA检测结果:与空白组相比,模型组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ含量升高（P0.05）。与模型组相比,干预各组的TNF-α含量较模型组皆明显降低（P0.05）;放血+刮痧组血清IL-1β、IL-6、IFN-γ含量降低,IL-10含量升高（P0.05）;刮痧+放血组血清IL-6含量降低,IL-10含量升高（P0.05）;放血组血清IL-6、IFN-γ含量降低（P0.05）;放血刮痧同时操作组血清IL-6含量降低（P0.05）。放血+刮痧组血清IL-6含量与放血刮痧同时操作组血清TNF-α、IL-6含量均较乌司他丁组及刮痧组降低（P0.05）。7、大鼠肺组织ELISA检测结果:与空白组相比,模型组肺组织TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10升高（P0.05）,TGF-β含量降低（P0.05）。与模型组比较,干预各组IFN-γ含量明显降低（P0.05）;放血组和放血+刮痧组TNF-α含量降低（P0.05）;刮痧组、放血组、放血+刮痧组和刮痧+放血组IL-6含量降低（P0.05）;刮痧组、放血组、放血+刮痧组和刮痧+放血组IL-10含量升高（P0.05）。放血组TGF-β含量较模型组及放血刮痧同时操作组升高（P0.05）。结论1、刮痧和放血疗法可改善SIRS模型大鼠异常降低的直肠温度和外周血白细胞计数。2、通过少商穴放血和大椎、肺俞穴刮痧的干预方式联合使用,能够减轻SIRS模型大鼠肺组织的急性炎症损伤,并可降低血清及肺组织中促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、INF-γ的水平,升高抗炎细胞因子IL-10、TGF-β的含量,调节促炎和抗炎的相对平衡状态。3、刮痧和放血疗法通过不同干预次序的介入,对机体产生的效应具有一定差异。在对SIRS模型大鼠的干预中,先放血后刮痧组相比于其他组别的干预次序组合,具有相对更优效的干预效应。