STAT3和HIF–1α在幽门螺杆菌致胃黏膜病变发展过程中的作用及机制
作者单位：南昌大学
学位级别：硕士
导师姓名：余琼芳
授予年度：2022年
摘 要：目的:幽门螺杆菌（H.pylori,Hp）是世界公认的一级致癌因子。Hp感染并定植胃黏膜会诱发一系列的癌前病变,最终导致胃癌的发生。因此,寻找Hp致病进程中的关键驱动分子并阐明它们在疾病发生发展过程中的作用及机制,对有效防治Hp相关性疾病极为重要。近年来有文献报道HIF-1α和STAT3参与了Hp介导的胃黏膜病变的发生发展过程,但机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨HIF-1α和STAT3在Hp感染导致胃黏膜损害、病变过程中的作用及机制,以期为胃癌的预防和分子治疗提供实验和理论依据。方法:1、Hp感染对GES-1细胞的HIF-1α和STAT3表达的影响:不同感染复数（multiplicity of infection,MOI）的Hp与胃上皮细胞GES-1共培养48 h后,采用实时荧光定量PCR和Western Blot实验分别检测GES-1细胞中HIF-1α和STAT3的表达。2、HIF-1α和STAT3在临床患者胃黏膜病变过程中的表达以及与Hp感染的关系:收集发生胃粘膜病变不同阶段的Hp阳性和Hp阴性患者临床病理组织样本,通过免疫组化分析不同疾病阶段的患者HIF-1α和STAT3的表达水平与Hp感染的相关性。3、HIF-1α和STAT3对GES-1细胞生物学表型的影响:（1）通过慢病毒方法分别构建HIF-1α和STAT3沉默表达的GES-1细胞株。（2）采用CCK-8法检测沉默HIF-1α和STAT3对Hp感染的胃上皮细胞GES-1增殖能力的影响。（3）采用Transwell实验检测沉默HIF-1α和STAT3对Hp感染的胃上皮细胞GES-1侵袭和迁移能力的影响。4、HIF-1α和STAT3对Vasorin（VASN）的调控作用:采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测沉默HIF-1α和STAT3对Hp感染的胃上皮细胞GES-1中VASN表达的影响。结果:1、随着Hp MOI值的升高,GES-1细胞中HIF-1α和STAT3的表达水平逐渐升高。2、HIF-1α和STAT3的表达水平和胃黏膜的病变发展进程相关,且受到Hp的调控。3、沉默HIF-1α和STAT3后,Hp感染的胃上皮细胞GES-1的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低。4、沉默HIF-1α和STAT3后,Hp感染的胃上皮细胞GES-1中VASN的表达降低。结论:1、Hp感染可上调胃上皮细胞GES-1中HIF-1α和STAT3的表达。2、HIF-1α和STAT3与Hp介导的胃黏膜病变程度有关。3、Hp通过上调HIF-1α和STAT3的表达促进胃上皮细胞GES-1的增殖、侵袭和迁移等肿瘤生物学行为。4、Hp通过上调HIF-1α和STAT3的表达上调下游分子VASN的表达。
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