大麻二酚对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的预防作用及机制研究

作     者：舒远辉 

作者单位：贵州医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王豫萍

授予年度：2021年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：大麻二酚 四氯化碳 急性肝损伤 抗炎抗氧化 PPAR-γ Nrf2 

摘      要：目的:研究大麻二酚(Cannabidiol,CBD)对四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl)诱导小鼠急性肝损伤的预防作用及其机制。方法:将45只6-8周C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为5组:对照组、模型组、CBD对照组、CBD干预组和阳性对照还原性谷胱甘肽(Glutathione,GSH)干预组(GSH干预组)),每组9只,CBD对照组、CBD干预组、GSH干预组分别腹腔注射CBD 5mg/kg、CBD 5mg/kg、GSH 200mg/kg,对照组、模型组注射相同剂量的生理盐水;两小时后模型组、CBD干预组、GSH干预组分别腹腔注射含20%CCl橄榄油5m L/kg建立急性肝损伤模型;24小时后麻醉摘眼球取血,颈椎脱臼处死取肝脏,检测血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)水平,HE染色检测肝组织病理变化,肝组织匀浆检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和GSH的活性或含量,Real-time PCR及western blot检测肝组织炎症因子:白细胞介素-1β(Interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)m RNA及蛋白表达水平,western blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(Peroxidase proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)、核转录因子-κB(Nuclear transcription factor kappa-B,NF-κB)、p-NF-κB、丝裂原活化蛋白激酶p38(Mitogen-activated protein kinase p38,MAPK p38)、p-MAPK p38、环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表达水平,免疫组织化学法(IHC)检测核因子类红细胞相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)在肝细胞中的表达水平。结果:与对照组相比较:模型组小鼠血清ALT、AST水平明显升高(P0.05)。结论:CBD能够减轻CCl诱导的小鼠急性肝损伤,抑制肝组织过氧化反应及炎症反应,其作用机制可能与CBD上调PPAR-γ及Nrf2的表达,发挥抗炎抗氧化作用有关。