原花青素B2对大鼠实验性糖尿病牙周炎影响的研究

作     者：崔灵欣 

作者单位：石河子大学 

学位级别：硕士

导师姓名：代海涛

授予年度：2021年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：原花青素 糖尿病牙周炎 TNF-α IL-1β 细胞凋亡 

摘      要：【目的】建立糖尿病复合牙周炎大鼠模型,测量牙周探诊深度(PD)、附着丧失(AL)及检测大鼠牙龈组织中相关炎性因子与细胞凋亡相关蛋白的表达,探究GSPB2对糖尿病牙周炎是否存在影响,并初步探究其作用机制。【方法】选取健康雄性SD大鼠60只随机分为:健康对照组(H组,15只)、牙周炎组(P组,15只)和糖尿病牙周炎组(DP组,30只)。通过牙周结扎+高糖饮食建立牙周炎大鼠模型,牙周结扎+高糖高脂饮食+腹腔注射链脲佐菌素溶液(STZ,30mg/kg)建立糖尿病牙周炎大鼠模型。建模8周后每组随机选择3只大鼠,测量血糖、上颌第二磨牙PD及AL,取上颌第二磨牙周围颌骨组织块作HE染色观察牙周组织形态以鉴定模型。建模完成后,DP组随机平均分为两组(DP1组和DP2组),连续灌胃给药8周,DP2给予150mg/(kg·d)GSPB2溶液,H组及DP1组给予等量生理盐水。测量大鼠上颌第二磨牙PD及AL,通过免疫组化染色检测大鼠牙周组织中TNF-α和IL-1β的表达,通过western blot免疫印迹法检测牙龈组织中Bcl-2、cytochrome c和Caspase-9的表达,Tunel染色观察牙龈组织细胞凋亡情况以及电镜观察细胞线粒体超微结构。【结果】DP组大鼠的平均空腹血糖为18.57mmol/L,明显高于H组,差异具有统计学意义(P0.05)。相较H组,DP1组大鼠牙龈组织中Bcl-2表达减少,cytochrome c及Caspase-9表达上调,差异具有统计学意义(P0.05),牙龈组织细胞凋亡率明显升高,差异具有统计学意义(P0.05),线粒体超微结构受损;而DP2组牙周炎症好转,cytochrome c及Caspase-9表达下降,Bcl-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P0.05),牙龈组织细胞凋亡率明显低于DP1组,差异具有统计学意义(P0.05),并恢复线粒体正常超微结构。【结论】通过牙周结扎联合饮食的方法可成功建立牙周炎大鼠模型,在此基础上注射STZ可成功建立Ⅱ型糖尿病复合牙周炎大鼠模型。单纯牙周炎并不会引起血糖升高,但糖尿病状态会加重牙周的炎症情况。GSPB2可以改善糖尿病牙周炎大鼠的牙周炎症状态及牙槽骨破坏程度,对糖尿病牙周炎具有一定保护作用,其机制可能与抑制了牙龈组织的细胞凋亡有关。