人乙肝肝硬化组织中Wnt1的表达对肝卵圆细胞介导肝脏再生的影响

作     者：樊爽 

作者单位：内蒙古医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王震侠

授予年度：2021年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：肝硬化 卵圆细胞 肝脏再生 Wnt信号转导通路 干细胞 

摘      要：背景及目的:肝脏主要依靠肝细胞的自我再生和肝内干细胞的增殖分化两大途径修复受损的肝脏。肝卵圆细胞是具有多分化潜能的干细胞,它在正常肝脏中处于静息状态,但是在肝硬化组织中被激活同时具有修复肝脏和促进肝硬化发展的双重作用。肝卵圆细胞在介导肝脏再生的过程中受到多种信号分子及其通路精确的调控。其中Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育的许多阶段以及肝脏发育中控制着各种分化途径,在成体的肝脏中能维持肝脏的稳态和再生修复。Wnt1信号蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路既可以调控肝卵圆细胞的增殖和分化,也可以调控肝细胞的自我再生过程。本研究的目的通过分析在肝硬化代偿期中肝卵圆细胞介导肝脏再生的作用,探讨Wnt1的表达对肝卵圆细胞介导肝脏再生的影响。方法:收集50例从2018年12月至2020年12月在内蒙古医科大学附属医院外科手术切除的Child—Pugh A级乙肝肝细胞肝癌的癌旁肝硬化组织标本。采用HE染色观察,并且行免疫组织化学法对Wnt1、肝卵圆细胞和增殖的肝细胞进行染色观察。根据HE染色观察的结果依据Laennec肝硬化分级标准对肝硬化程度进行分组,比较不同肝硬化程度组间肝卵圆细胞数以及增殖的肝细胞数的差异,并分析肝硬化程度与肝卵圆细胞数以及增殖的肝细胞数之间的相关性。根据Wnt1免疫组化染色的结果依据其表达的高低进行分组,比较不同Wnt1表达程度组间肝卵圆细胞数以及增殖的肝细胞数的差异,并分析Wnt1表达程度与肝卵圆细胞数以及和增殖的肝细胞数之间的相关性。分别以肝卵圆细胞数和增殖的肝细胞数为因变量,采用多元线性回归分析肝硬化程度和Wnt1表达程度分别对肝卵圆细胞数和增殖的肝细胞数的影响。结果:1.肝硬化程度分组按照Laennec肝硬化分级系统标准,轻度肝硬化组织31例,中度肝硬化组织19例。Wnt1表达程度分组按照半定量积分=染色强度评分×阳性细胞数评分的标准,Wnt1低表达27例,Wnt1高表达23例。2.轻度肝硬化组织中肝卵圆细胞数3.05±1.08个/mm,中度肝硬化组织中肝卵圆细胞数4.99±1.65个/mm,两组比较具有统计学意义(P0.05)。轻度肝硬化组织中的Ki-67阳性的肝细胞数2.07±1.07个,中度肝硬化组织中Ki-67阳性的肝细胞数1.30±0.72个,两组比较具有统计学意义(P0.05)。***1低表达组中肝卵圆细胞数2.74±0.88个/mm,Wnt1高表达组中肝卵圆细胞数为5.01±1.41个/mm,两组比较具有统计学意义(P0.05)。Wnt1低表达组中Ki-67阳性的肝细胞数2.16±1.07个,Wnt1高表达组中Ki-67阳性的肝细胞数为1.33±0.76个,两组比较具有统计学意义(P0.05)。4.肝硬化程度与肝卵圆细胞数呈正相关(r=0.522;P0.05),与Ki-67阳性的肝细胞数呈负相关(-0.357;P0.05)。***1表达程度与肝卵圆细胞数呈正相关(r=0.737;P0.05),与Ki-67阳性的肝细胞数呈负相关(r=-0.395;P0.05)。6.分别以肝卵圆细胞数和Ki-67阳性的肝细胞数为因变量,以肝硬化程度和Wnt1表达程度为自变量,进行多元线性回归分析。肝卵圆细胞数的影响因素多元线性回归分析(模型R=0.713,调整R=0.701;对回归模型检验F=58.508,P0.05)。结果显示肝硬化程度和Wnt1表达程度对肝卵圆细胞数均有影响,根据其标准回归系数的绝对值大小,得出Wnt1表达程度对肝卵圆细胞数的影响程度高于肝硬化程度对其的影响。Ki-67阳性的肝细胞数影响因素多元线性回归分析(模型R=0.256,调整R=0.224;对回归模型检验F=8.084,P0.05)。结果显示肝硬化程度和Wnt1表达程度对Ki-67阳性的肝细胞数均有影响,根据其标准回归系数的绝对值大小,得出Wnt1表达程度对Ki-67阳性的肝细胞数的影响程度高于肝硬化程度对其的影响。结论:1.在肝硬化代偿期中,随着肝硬化程度的增加,肝细胞自我再生受到抑制,肝卵圆细胞可能是介导肝脏再生的主要来源。2.在肝硬化代偿期中,随着肝硬化组织中Wnt1表达程度的增加,肝细胞自我再生受到抑制,Wnt1表达可能主要通过激活肝卵圆细胞的Wnt信号转导通路促进肝脏再生。***1表达程度对肝卵圆细胞介导肝脏再生的影响程度高于肝硬化程度对其的影响,提示肝硬化程度的变化可能是肝卵圆细胞介导肝脏再生的前提条件,Wnt1表达对肝卵圆细胞介导肝脏再生发挥着较大的作用。