褐藻多糖硫酸酯抑制尿酸介导URAT1、GLUT9表达的机制研究
作者单位:广东海洋大学
学位级别:硕士
导师姓名:刘华忠
授予年度:2021年
学科分类:1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含:心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学]
主 题:褐藻多糖硫酸酯 尿酸 尿酸转运体1 葡萄糖转运蛋白9
摘 要:高尿酸血症是一种体内嘌呤代谢紊乱,导致血尿酸增多的代谢性疾病。据流行病学研究调查显示,高尿酸血症患病率呈上升趋势和逐渐低龄化。在我国高尿酸血症患病率表现出性别差异,年龄差异,地区差异性的特征。男性患病率显著高于女性;男性在青壮年阶段患病率最高,女性患病率在更年期前显著低于男性水平,更年期后与男性相当;沿海城市患病率高于内陆城市,城市高于农村。高尿酸血症还是多种疾病的危险因素,因此对高尿酸血症的防治迫在眉睫。目前治疗高尿酸血症的药物多为合成药物,毒副作用较大会引起患者出现头痛、恶心、呕吐、皮肤过敏、肝肾损伤等不良反应。因此迫切需要毒副作用较小的降尿酸药物。高尿酸血症形成的主要原因是尿酸排泄障碍,尿酸转运体1(URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)是两个重要的尿酸重吸收蛋白,二者是目前开发治疗高尿酸血症药物的重要靶点。褐藻多糖硫酸酯(FPS)是天然的海洋活性物质,具有多种生物活性,已用作肾脏病临床药物近20年。近年来有研究表明,FPS可通过抑制尿酸生成并促进尿酸肾脏排泄,发挥降尿酸作用,但其分子机制尚未明确。本研究以人肾小管上皮细胞(HK-2)为对象,初步研究了FPS抑制尿酸(UA)介导URAT1、GLUT9表达的调控机制。本研究发现,在UA浓度达到200μg/mL时,HK-2细胞中URAT1和GLUT9蛋白表达量显著增加,25μg/mL FPS能使URAT1和GLUT9的蛋白表达量回到正常水平。表明,FPS可通过抑制UA对URAT1和GLUT9表达的介导,降低UA重吸收,达到降尿酸的效果。使用TLR4抑制剂和NF-κB达信号通路抑制剂处理细胞后,UA暴露HK-2细胞中URAT1和GLUT9基因表达水平回复正常,表明TLR4/NF-κB信号通路参与调控UA介导的URAT1和GLUT9表达。FPS表现出类同于抑制剂作用效应,表明FPS可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制UA介导URAT1和GLUT9基因表达。PI3K/Akt信号通路抑制剂和JNK MAPK信号通路抑制剂分别在抑制Akt、JNK的磷酸化状态下,使UA暴露HK-2细胞中URAT1和GLUT9表达水平下调,表明PI3K/Akt和JNK MAPK信号通路参与调控UA介导的URAT1和GLUT9表达。FPS能抑制Akt和JNK活化,并下调UA处理细胞中URAT1和GLUT9的表达水平,表明FPS可通过抑制PI3K/Akt和JNK MAPK信号通路抑制UA介导URAT1和GLUT9基因表达。综上所述,FPS能通过抑制UA/TLR4活化NF-κB、PI3K/Akt和JNK MAPK信号通路,阻滞UA介导肾小管细胞HK-2表达URAT1和GLUT9。该结果从细胞与分子水平,初步阐释了FPS促进尿酸盐肾脏排泄的分子机理,为FPS相关降尿酸药物研发提供了理论基础。