温热环境和硫化氢对猪乳腺催乳素受体表达的影响及其机制

作     者：胡宝玉 

作者单位：华南农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张永亮

授予年度：2019年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：PRLR H2S HC11细胞 温热环境 β-casein 乳腺泌乳 

摘      要：温热环境和硫化氢对母猪泌乳性能与健康具有重要影响。在乳腺组织中,催乳素(PRL)与靶细胞膜表面的催乳素受体(PRLR)结合,激活多个信号通路(JAK2/STAT、PI3K/Akt和MAPK等途径)从而调控下游基因的表达。PRLR在乳腺的表达关系到动物的泌乳以及乳品质。Mi RNA是小的内源性非编码RNA,在动物体内主要是通过靶向m RNA 3′UTR发挥作用,研究发现mi RNA可以参与泌乳调控。本研究首先检测夏季和冬季组的乳腺组织PRLR和β-casein的表达,对乳腺组织进行mi RNA测序,分析差异表达的mi RNAs并进行验证等。然后,采用小鼠乳腺上皮细胞(HC11细胞)为研究对象,对细胞进行高温和硫化氢处理后,检测PRLR等基因的表达和相关mi RNAs的表达。实验结果如下:1.夏季高温环境抑制乳腺PRLR m RNA和蛋白的表达;高温处理分化前和分化后HC11细胞1 h,均显著降低PRLR蛋白的表达。***11细胞诱导分化后,显著提高PRLR m RNA、β-caseinm RNA和蛋白的表达。3.100μM和600μM Na HS显著降低PRLR和β-casein的蛋白表达。100μM和600μM Na HS显著抑制HC11细胞PRLR、Akt m RNA的表达;600μM Na HS极显著抑制HC11细胞STAT5a m RNA的表达。*** RNA测序共检测到有196个差异表达的mi RNA(P≤0.05);Mi RNA保守性分析发现mi RNAs在牛、人、猪和鼠等不同物种上具有高度的保守性;差异mi RNAs靶基因主要富集在T细胞受体、肿瘤、吞噬体、N HTLV-1感染、NF-κB和B细胞受体等信号通路上。