大麻二酚和大麻籽油对小鼠皮肤光损伤的保护作用及机制研究

作     者：唐丹丹 

作者单位：广东工业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：杜志云;周渭

授予年度：2021年

学科分类：081702[工学-化学工艺] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

主      题：紫外 大麻二酚 大麻籽油 光损伤 

摘      要：目的本文利用体外抗氧化模型、UV光损伤小鼠皮肤模型,探讨大麻二酚和大麻籽油对UV诱导的皮肤光损伤的保护作用和机制研究,以及大麻二酚和大麻籽油的体外抗氧化供功效,为大麻二酚和大麻籽油作为防晒/晒后修复产品提供初步的科学依据。方法1.对大麻二酚和大麻籽油进行了DPPH、ABTS自由基清除实验,构建Ha Cat细胞UVB模型,验证大麻二酚和大麻籽油的抗氧化活性;2.构建小鼠UVA+UVB光损伤模型,对大麻二酚、大麻籽油保护小鼠皮肤光损伤模型的药效进行表观和皮肤水分含量评价;3.通过HE染色、Masson染色和Weigert’s间苯二酚品红染色,观察大麻二酚、大麻籽油对小鼠光损伤皮肤组织结构的影响;4.通过ELISA、免疫组化、Western Blot等方法研究了大麻二酚和大麻籽油对小鼠皮肤光损伤的保护作用的机理研究。结果1.体外抗氧化功效研究结果表明:大麻二酚和大麻籽油抑制DPPH自由基的IC50分别约为0.75mg/ml和70mg/ml,抑制ABTS自由基的IC50分别约为1.5mg/ml和40mg/ml,表现出一定的抗氧化活性。Ha Cat细胞UVB模型验证结果显示,大麻二酚保护UVB光损伤Ha Cat细胞的效果不显著,而大麻籽油对UVB损伤后的Ha Cat细胞有较为显著的修复效果;2.小鼠皮肤UVA+UVB光损伤实验结果显示:大麻二酚和大麻籽油均可显著改善光老化小鼠的皮肤表观、皮肤失水;H＆E染色、胶原纤维染色和弹力纤维染色结果显示,大麻二酚和大麻籽油可显著降低紫外诱导的小鼠表皮异常增厚,同时抑制胶原纤维、弹力纤维降解。大麻二酚虽未能提高抗氧化酶（CAT、SOD与GSH-Px）的酶活力和羟脯氨酸Hy P的水平,但显著降低ROS、MDA的水平,以及抑制炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的过度表达,提高皮肤屏障因子FLG、INV和LOR的表达水平;此外,大麻二酚还能显著降低MMP-1与MMP-3的异常分泌,抑制NF-κB信号通路表达来缓解UVA+UVB诱导的皮肤光损伤。皮肤涂布给予大麻籽油可显著提高抗氧化酶SOD、CAT与GSH-Px的酶活力和Hy P的水平,降低ROS、MDA的含量;大麻籽油可有效降低炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的过度表达,并提高皮肤屏障因子FLG、INV和LOR的水平;此外,大麻籽油还能显著降低MMP-1与MMP-3的异常分泌,抑制NF-κB信号通路表达来缓解UVA+UVB诱导的皮肤光损伤。结论大麻二酚和大麻籽油具有一定抗氧化活性,并且对UV诱导的小鼠皮肤光损伤具有良好的保护作用,使光损伤程度减轻,保持皮肤的含水量以及胶原纤维和弹力纤维,下调炎症因子和MMPs,抑制NF-κB信号通路的表达。