蜂毒穴位注射对偏头痛大鼠血浆SP、CGRP及脑组织C-fos影响的研究

作     者：王亚飞 

作者单位：北京中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐峰

授予年度：2021年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：CGRP C-fos 大鼠 蜂毒 偏头痛 SP 行为学 

摘      要：目的:观察蜂毒穴位注射对硝酸甘油所致偏头痛大鼠行为症状学以及血浆SP、CGRP含量和脑组织中C-fos表达的影响,来探讨蜂毒穴位注射治疗偏头痛的可能作用机制。方法:将健康雄性SD大鼠48只,按照随机数字表法分为空白组、模型组、佐米曲普坦组、蜂毒低剂量组、蜂毒中剂量组、蜂毒高剂量,共6组,每组8只,后5组大鼠通过从后颈部皮下注射硝酸甘油10mg/kg制作偏头痛大鼠模型,造模成功5min后,给予相应药物干预,给药后2h、4h两个时间点取血,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆SP、CGRP含量;给药后4h大鼠断头取脑组织,采用免疫蛋白印迹法（Western Blot WB）检测脑组织中C-fos表达;并观察各组大鼠行为学表现。结果:1.空白组大鼠没有出现双耳变红的现象,其他各组大鼠均在4-5min后双耳变红;模型组、佐米曲普坦组、蜂毒低、中、高剂量组耳红出现时间无统计学意义;与模型组大鼠相比佐米曲普坦组、蜂毒低、中、高剂量组耳红消失时间均明显缩短（P0.05,P0.01）;与空白组大鼠比较模型组大鼠在0-30min、30-60min、60-90min、90-120min四个时间段挠头次数、爬笼次数显著增多（P0.01）;与模型组相比,佐米曲普坦组、蜂毒中、高剂量组在0-30min、30-60min、60-90min、90-120min这四个时间段大鼠挠头次数、爬笼次数均显著减少（P0.05,P0.01）;蜂毒低剂量组在0-30min、30-60min、60-90min、90-120min这四个时间段大鼠挠头次数显著减少,在0-30min这个时间段大鼠爬笼次数显著减少（P0.05,P0.01）;表明蜂毒穴位注射可明显改善偏头痛大鼠行为学症状,以蜂毒中、高剂量组更为显著。2.与空白组大鼠相比,模型组血浆SP、CGRP含量显著升高,说明偏头痛大鼠造模成功。与模型组相比,在2h和4h两个时间点佐米曲普坦组、蜂毒中、高剂量组血浆中SP、CGRP含量均显著降低（P0.05,P0.01）,蜂毒低剂量组血浆中CGRP含量显著降低（P0.01）;蜂毒中、高剂量组4h比2h血浆中SP、CGRP减少明显（P0.05,P0.01）,蜂毒低剂量组4h 比 2h血浆中CGRP减少明显（P0.05,P0.01）,表明蜂毒穴位注射可明显降低血浆中SP、CGRP含量,且4h比2h作用更为显著。3.与空白组比较,模型组大鼠的C-fos蛋白表达明显上调,差异具有统计学意义。与模型组比较,佐米曲普坦组、蜂毒中剂量组、蜂毒高剂量组的C-fos蛋白表达均显著下降,差异有统计学意义（P0.01）,表明蜂毒穴位注射可通过下调脑组织中C-fos表达治疗偏头痛。实验结论:蜂毒穴位注射可以改善硝酸甘油所致偏头痛大鼠的行为症状学表现,并且抑制血浆中SP、CGRP释放,减轻了神经源性炎症反应,减少伤害性刺激的传入和神经元的激活,下调脑组织中C-fos的表达水平从而起到治疗偏头痛的作用。