慢性束缚应激对小鼠卵巢卵泡发育的影响及其机制研究

作     者：柴丹丹 

作者单位：南昌大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张春平

授予年度：2020年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

主      题：慢性应激 卵巢 黄体 排卵 P2X7R 

摘      要：目的:当前社会竞争日趋激烈,生活节奏加快,慢性应激已成为危害人们身体和心理健康的主要问题。研究发现应激对动物的生殖系统及生殖能力也产生负面的影响,引发生殖内分泌失调和生殖储备功能下降,但其影响机制尚不完善。研究表明P2X7R参与了慢性应激诱导的多种病理改变,P2X7R是由高浓度的ATP激活的非选择性门控阳离子通道,广泛分布在不同类型的细胞中,但P2X7R是否介导了慢性应激对卵巢功能的影响未有研究。本课题将探讨慢性应激对卵巢卵泡发育的影响及P2X7R是否介导了这一过程。方法:建立慢性束缚应激小鼠模型:将80只生理周期正常的昆明雌性小鼠随机分为4组,对照组、应激组、BBG（P2X7R抑制剂）组、BBG加应激组（n=20）。将应激组、BBG加应激组小鼠每天放入50ml有孔的离心管内4小时;BBG组及BBG加应激组每天经腹腔注射BBG 50mg/kg,对照组经腹腔注射等量生理盐水,持续8周。每天上午7点对每只小鼠行生殖道分泌物涂片,通过生殖道涂片监测小鼠动情周期的变化;化学发光法检测血清雌二醇和孕激素水平变化;HE染色观察卵巢组织形态的变化;实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测各组卵巢P2X7R的表达;腹腔注射BBG观察其是否可以缓解慢性应激对卵巢的影响。结果:我们发现慢性束缚应激小鼠较对照组小鼠体重明显减轻;生殖道分泌物涂片发现动情周期延长;血清雌二醇无明显变化,而孕激素明显降低;HE染色发现卵巢组织中黄体数目明显减少,黄体数目间接反映排卵数目,表明应激组小鼠排卵减少;实时荧光定量PCR和蛋白印迹发现应激组卵巢中P2X7R表达明显升高;而使用BBG处理后,部分缓解了慢性应激对排卵和孕激素分泌的影响。结论:1、慢性束缚应激小鼠体重增长缓慢,动情周期紊乱;2、慢性束缚应激小鼠孕激素分泌降低,卵巢中黄体数目减少;3、慢性束缚应激小鼠卵巢中P2X7R高表达;BBG可以部分缓解慢性应激对排卵和孕激素分泌的影响。