卡格列净对慢性心力衰竭小鼠的作用及其机制研究

作     者：胡志明 

作者单位：南昌大学 

学位级别：硕士

导师姓名：朱凌燕

授予年度：2021年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：糖尿病 SGLT2受体抑制剂 卡格列净 心力衰竭 Hippo通路 

摘      要：目的:探讨钠葡萄糖转运蛋白（SGLT2受体抑制剂）-卡格列净对慢性心力衰竭小鼠的作用及其机制研究。方法:以C57小鼠为背景构建慢性心力衰竭小鼠模型,通过实时荧光定量PCR实验和免疫蛋白印迹（Westernblot）实验验证慢性心力衰竭小鼠模型的构建。在动物实验中,通过实时荧光定量PCR实验、Western Blot试验、心脏与体重比值大小比较、心脏大体观比较、心脏组织IHC染色、WGA染色以及CD31染色,评估卡格列净对慢性心力衰竭小鼠的作用,然后将组织样本送去测序,并验证测序结果,推测卡格列净对慢性心力衰竭小鼠作用的机制;在细胞实验中,先通过PE诱导原代心肌细胞肥大以及心衰指标的上升,然后用卡格列净处理以及敲低YAP/TAZ m RNA的表达水平,验证卡格列净可以通过Hippo通路发挥改善心衰的作用。结果:在动物实验中,卡格列净可以降低慢性心力衰竭小鼠的心衰标志物A型利钠肽（ANP）和B型利钠肽（BNP）的表达水平,心脏称重与小鼠体重比值显示,卡格列净可以降低慢性心力衰竭小鼠心脏与体重的比值,而Westernblot和IHC实验显示卡格列净可以降低慢性心力衰竭小鼠心脏应激纤维化的水平,心脏组织WGA染色显示卡格列净可以抑制心力衰竭小鼠心脏的心肌细胞肥大,心脏组织CD31染色显示卡格列净可以增加慢性心力衰竭小鼠心脏的毛细血管密度,心脏组织RNA测序提示Hippo通路是卡格列净对慢性心力衰竭小鼠作用的关键分子机制之一,并且通过动物心脏组织Westernblot实验进一步证明了卡格列净通过Hippo通路对慢性心力衰竭小鼠发挥作用。在细胞实验中,去氧肾上腺素（PE）诱导原代心肌细胞的心衰标志物指标ANP和BNP的表达增加且导致其肥大,而卡格列净可以降低PE诱导的ANP和BNP以及YAP/TAZ下游基因ANKRD1、CYR61、β-MHC m RNA的表达水平同时可以抑制心肌细胞肥大,最后敲低YAP/TAZ m RNA的表达水平可以抑制PE诱导的ANP的表达水平。结论:卡格列净通过作用于心肌细胞对慢性心力衰竭小鼠起到了预防和治疗的作用,其机制与Hippo通路具有一定的相关性。