BDE-153对C57BL/6小鼠脂肪因子和胰岛素敏感性的影响及其机制研究

作     者：李美艳 

作者单位：新疆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘早玲

授予年度：2021年

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主      题：2,2’,4,4’,5,5’-六溴联苯醚 胰岛素敏感性 脂肪因子 PPARγ AMPKα 

摘      要：目的:研究不同暴露剂量的2,2’,4,4’,5,5’-六溴联苯醚（2,2’,4,4’,5,5’-Hexabromodiphenyl ether,BDE-153）对C57BL/6小鼠胰岛素敏感性和脂肪细胞因子的影响,并初步探讨其可能的发生机制。方法:将36只雄性C57BL/6小鼠依照体重随机分为6组,分别为BDE-153高剂量组（200mg/kg）、较高剂量组（100mg/kg）、中剂量组（50mg/kg）、较低剂量组（25mg/kg）、低剂量组（5mg/kg）和对照组,每组6只。适应性饲养1周后,除对照组给予玉米油灌胃外,其余各组通过灌胃的方式给予不同剂量的BDE-153药物,给药4周。饲养2周末,做腹腔注射葡萄糖耐量实验。4周染毒结束后,取血清检测甘油三酯（Triglyceride,TG）、总胆固醇（Total cholesterol,T-CHO）、高密度脂蛋白胆固醇（High-density lipoproteincholesterol,HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）四项血脂指标,血清胰岛素、瘦素和脂联素的含量。取肝脏组织称量重量,计算肝脏的脏器系数,并通过HE染色观察组织形态学变化的情况。取胰腺称重,计算脏器系数,通过免疫组织化学染色观察胰岛的病理学改变。做q PCR和Western-Blot检测瘦素、脂联素、PPARγ和AMPKα的m RNA和蛋白表达水平。结果:（1）对小鼠体重进行重复测量分析发现,分组×时间的交互作用无统计学意义（F=1.256,P0.05）,时间因素对小鼠体重的影响有统计学意义（F=133.595,P0.05）,即染毒第0周、第1周、第2周、第3周和第4周不同时间小鼠体重具有差异。分组因素对小鼠体重的影响有统计学意义（F=2.766,P0.05）,即不同组间小鼠体重具有差异。（2）与对照组相比:染毒高剂量组小鼠血清TG含量增加,较低剂量组小鼠血清TG含量减少（P0.05）;高剂量组、较高剂量组和中剂量组小鼠血清T-CHO含量增加（P0.05）;高剂量组、较高剂量组、中剂量组和较低剂量组小鼠血清LDL-C含量增加（P0.05）;高剂量组、较高剂量组、中剂量组和低剂量组小鼠血清HDL-C含量减少（P0.05）。（3）与对照组相比:高剂量组、较高剂量组和中剂量组小鼠血清瘦素含量增加（P0.05）;高剂量组、较高剂量组、较低剂量组和低剂量组小鼠血清脂联素含量减少（P0.05）;中剂量组小鼠血清胰岛素含量减少（P0.05）。（4）肝脏病理组织学结果显示,BDE-153染毒后小鼠肝脏明显肿大（P0.05）,肝脏颜色变暗,表面不光滑,肝细胞内有双核或多核出现,且有脂滴聚集的现象。（5）糖耐量实验显示,BDE-153染毒剂量组小鼠在葡萄糖注射30min后血糖上升较对照组缓慢,高剂量组和较低剂量组小鼠血糖值均低于对照组小鼠血糖值（P0.05）。（6）胰腺病理组织学结果显示,与对照组相比,BDE-153染毒后,高剂量组和较高剂量组小鼠胰腺重量有所增加（P0.05）。光镜下观察小鼠胰岛形态,显示BDE-153染毒后胰岛的数量有所增加,体积增大,形状不规则。胰岛素染色阳性率随BDE-153染毒剂量的增加而增加（P0.05）。（7）BDE-153染毒后各染毒组与对照组相比:高剂量组小鼠瘦素m RNA和蛋白表达上调（P0.05）;高剂量组和较高剂量组小鼠脂联素m RNA表达下调,中剂量组小鼠脂联素m RNA表达上调,高剂量组、较高剂量组、较低剂量组和低剂量组小鼠脂联素蛋白表达下调（P0.05）;高剂量组和中剂量组小鼠PPARγ的m RNA表达上调,高剂量组、较高剂量组和中剂量组小鼠PPARγ蛋白表达均上调（P0.05）;各剂量组小鼠AMPKα的m RNA和蛋白表达水平均下调,高剂量组和较高剂量组p-AMPKα蛋白表达水平较对照组下调（P0.05）。结论:（1）BDE-153导致小鼠出现TG、TCHO和LDL-C升高,HDL-C降低,小鼠肝脏肿大,肝细胞内脂滴聚集等脂肪肝化和高血脂症状。（2）BDE-153导致小鼠胰腺重量增加,胰岛素染色阳性率呈剂量依赖性上升,影响小鼠胰岛形态和功能。（3）BDE-153暴露导致小鼠瘦素和PPARγ的m RNA和蛋白表达水平上调,脂联素、AMPKα和p-AMPKα的m RNA和蛋白表达水平下调,BDE-153可能通过影响PPARγ和AMPKα的表达干扰脂肪细胞分化,并影响胰岛素的敏感性。