Ipilimumab体外活性检测方法的建立、优化及验证

作     者：邵文琦 

作者单位：华东理工大学 

学位级别：硕士

导师姓名：庄英萍;吴珩

授予年度：2021年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：Ipilimumab CTLA-4 活性检测方法 方法验证 

摘      要：Ipilimumab是全球首个也是目前唯一获批上市的抗CTLA-4的单克隆抗体。作为肿瘤免疫检查点抑制剂,Ipilimumab已获准单药或联合给药用于多种实体瘤的免疫治疗,并在临床上获得了显著的疗效,为广大肿瘤患者带来了新的希望。本研究建立了多种可用于检测Ipilimumab体外活性的方法:ELISA法检测Ipilimumab与rhCTLA-4结合活性的方法、FACS法检测Ipilimumab竞争抑制B7-1与细胞膜CTLA-4结合活性的方法,以及通过检测PBMC细胞中T细胞增殖与活化所表达的IL-2浓度,从而评价Ipilimumab活性的方法。对ELISA法检测Ipilimumab与rhCTLA-4结合活性和FACS法检测Ipilimumab竞争抑制B7-1与细胞膜CTLA-4结合活性的方法进行了验证,验证结果显示:两种方法的专属性和耐用性良好,模拟相对结合活性50%～200%的Ipilimumab供试品,多次活性测定的回收率在90～104%的范围内,精密度的重复性和中间精密度均小于15.0%,线性关系系数均大于0.98,说明这两种分析方法均能够真实、准确、稳定地反映Ipilimumab活性。Ipilimumab体外活性方法的研究与建立,可为国内外Ipilimumab生物类似药开发,以及以CTLA-4为靶点的创新型抗体或双特异性抗体等产品研究,提供体外活性检测方法的基础和参考。