个体化穴位贴敷治疗阿片类药物相关性便秘的临床观察及作用机制研究

作     者：齐权 

作者单位：河北大学 

学位级别：硕士

导师姓名：赵永辰;张百霞

授予年度：2021年

学科分类：100506[医学-中医内科学] 1005[医学-中医学] 10[医学] 

主      题：阿片类药物相关性便秘 穴位贴敷 网络药理学 分子对接 作用机制 

摘      要：目的:1.研究观察个体化穴位贴敷治疗阿片类药物相关性便秘的临床疗效。2.通过网络药理学和分子对接的方法探究穴位贴敷组方治疗阿片类药物相关性便秘的作用机制。方法:一、临床试验部分1.将符合纳入标准的70例阿片类药物相关性便秘患者随机分为两组:治疗组（n=35）采用个体化穴位贴敷治疗,对照组（n=35）予以乳果糖治疗。2.治疗1周后观察两组患者首次排便时间、CCS与BSFS评分以及不良反应情况;并在停止用药后,再进行一个周期的随访观察,掌握便秘复发状况。二、网络药理学部分1.利用TCMSP数据库、TCMID数据库及中国天然产物化学成分库查找穴位贴敷组方药物化学成分;进一步通过TCMSP及STITCH数据库预测化合物所对应的靶点,并通过Uni Prot数据库将靶蛋白名转化成靶基因名;同时通过Genecards数据库、OMIM数据库及TTD数据库筛选得到与OIC相关的靶点。2.将穴位贴敷组方化合物对应靶点与OIC相关靶点比对以获得共有靶点,并通过Cytoscape3.8.2软件构建“药物-化学成分-交集靶点-疾病的关系网络。3.将交集靶点输入STRIING数据库构建与OIC相关的PPI网络。利用Cytoscape3.8.2软件对PPI网络进行可视化,并对网络进行拓扑分析,筛选穴位贴敷组方治疗OIC的关键作用靶点,同时反向寻找关键靶点所对应的化学成分作为关键化学成分。4.应用薛定谔软件进行分子对接验证关键化学成分与关键靶点相结合的可靠性;并在DAVID平台对关键靶点进行富集分析,进一步探究穴位贴敷组方治疗OIC的作用机制。结果:一、临床试验部分1.在治疗期间有5例患者因不同原因被剔除,最终纳入65例,其中穴位贴敷组33例,乳果糖组32例。2.较试验前两组在BSFS评分、CCS评分及各单项症状评分上均有改善,差异具有统计学意义（P0.001）。3.试验后两组在排便难易程度、排便辅助类型、每次排便时间及每日排便不成功的次数上比较差异无统计学意义（P0.05）。4.两组在首次排便时间、粪便性状、排便频率、排便不尽感、腹部疼痛等方面比较,存在统计学差异（P0.05）,穴位贴敷组优于乳果糖组。5.两组临床治疗效果上比较存在统计学差异（P0.05）,穴位贴敷组有效率为87.88%,高于乳果糖组（71.88%）。6.在试验期间,穴位贴敷组有1例出现皮肤过敏,乳果糖组2例存在恶心症状,经相应治疗后症状有所减轻。7.两组复发情况上比较存在统计学差异（P0.05）,穴位贴敷组复发率为20.69%明显低于乳果糖组复发率（47.83%）,且穴位贴敷组停药复发时间也晚于乳果糖组。二、网络药理学部分1.通过对穴位贴敷组方作用于OIC靶点的生物网络分析,发现27个化学成分为穴位贴敷组方治疗OIC的有效成分,22个靶点为穴位贴敷组方治疗OIC的作用靶点。其中芦荟大黄素、川陈皮素、木犀草素及柚皮素4个主要化合物及AKT1、MAPK3、TNF、CREB1、HMOX1等9个关键靶点在穴位贴敷组方治疗OIC中发挥了重要的作用。2.分子对接结果显示关键化学成分与关键靶点具有较好的结合性。3.经PPI网络分析,发现AKT1与TNF、TNF与NOS2两组蛋白对关系密切互相作用在治疗OIC中发挥重要作用。4.经GO功能富集分析筛选得到生物学过程（BP）相关条目共117条,与OIC的治疗直接相关的通路有MAPK活性的激活、MAPK级联、ERK1和ERK2级联的正向调节、一氧化氮合酶活性的调控等。5.经KEGG通路富集分析共获取93条信号通路,主要涉及TNF、癌症、MAPK及Toll样受体信号通路等。结论:1.个体化穴位贴敷及乳果糖治疗OIC均有疗效,且总体疗效个体化穴位贴敷优于乳果糖;个体化穴位贴敷在缩短首次排便时间及改善粪便性状、排便频率、排便不尽感及腹部疼痛方面优于乳果糖;且个体化穴位贴敷治疗OIC复发率低,远期疗效确切。2.本课题基于网络药理学方法对穴位贴敷组方治疗OIC的有效化学成分及作用靶点进行了预测,系统的阐释了其潜在的分子作用机制,为其临床试验提供了确切的数据支持。