白头翁皂苷B4对卵白蛋白诱导的过敏性结膜炎的疗效和机理研究

作     者：马戈 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐国旭

授予年度：2020年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：白头翁皂苷B4 过敏性结膜炎 卵白蛋白 肥大细胞脱颗粒 

摘      要：目的:验证白头翁皂苷B4滴眼液和注射液对卵白蛋白诱导的过敏性结膜炎的疗效及研究其可能的治疗机理,为以后可能开发针对过敏性结膜炎的治疗提供新的药源和新的方法。方法:将64只雄性清洁级SD大鼠（体重200-250g）分为8组,除正常组外前13天每两天一次总共7次对每只实验大鼠经腹腔注射0.02%卵白蛋白溶液1ml与4%氢氧化铝佐剂1ml的混合液,40mg氢氧化铝可使200μg的卵白蛋白在佐剂的作用下在体内缓慢释放以充分致敏。7次致敏后连续7天每天各组大鼠按照每个给药组不同的处理进行给药,给药完成后对模型组和给药组每眼滴10μL 1mol/L的DTT以消除结膜黏液屏障,提高卵白蛋白攻击效果,15min后用2%卵白蛋白溶液20μL滴眼攻击激发过敏性结膜炎。通过对大鼠眼部临床评分、多种染色组织切片检测计数、尾静脉注射伊文思蓝测定血管通透性改变、流式细胞术测定大鼠脾细胞中T细胞亚群的比例的方法来评定药物治疗效果,通过ELISA测定血清中细胞因子的含量、ELISA测定血清中IgE的含量、全自动血细胞分析仪测定外周血白细胞比例和数量、Western Blot测定大鼠脾细胞蛋白表达的差异的方法对药物的作用机理做相关研究和探讨。结果:在卵白蛋白诱导的大鼠过敏性结膜炎中,白头翁皂苷B4制剂能够减轻眼部体征并降低眼部临床评分,在组织切片中抑制结膜组织结构改变,减少嗜酸性粒细胞在结膜组织中的浸润,并抑制肥大细胞脱颗粒。它能减少眼部伊文思蓝渗出量,改善眼部血管通透性,并修复CD4+T细胞与CD8+T细胞比例,修复免疫内环境。Western Blot中白头翁皂苷B4能够抑制p-JNK与p-p38的表达,细胞因子、IgE和外周血白细胞相关的作用机理仍留待将来进一步的实验研究来阐明。结论:白头翁皂苷B4对过敏性结膜炎引起的眼部改变的治疗有明确疗效,研究结果可为过敏性结膜炎及相关眼病治疗的新药研发提供新的选择和参考。如何条件更深入、系统地对其疗效及治疗机理进行研究,可为新一代抗过敏性结膜炎制剂的成功研发奠定重要的基础,并可为过敏性眼病的治疗提供新的思路。