针刺结合益气健脾中药复方对糖尿病胃轻瘫大鼠胃动力及RhoA-ROCK信号通路的影响

作     者：崔晶晶 

作者单位：锦州医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：付晓

授予年度：2020年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：糖尿病胃轻瘫 针刺 益气健脾中药复方 RhoA-ROCK信号通路 

摘      要：目的观察针刺结合益气健脾中药复方对糖尿病胃轻瘫(Diabetic gastroparesis,DGP)大鼠的作用效果,通过检测其对胃排空率、小肠推进率及RhoA-ROCK信号通路、p-MYPT1、p-MLC蛋白的影响,探究其影响DGP大鼠胃肠动力的作用机制,为DGP的治疗提供更好的方法和依据。方法采用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)尾静脉注射及高糖高脂不规则喂养法制备DGP模型,将成模大鼠随机分为模型组、针刺组、益气健脾中药复方组(中药组)、针刺结合益气健脾中药复方组(针药组)和多潘立酮组(西药组)。针刺组每日给予三阴交、足三里穴针刺30min治疗,中药组每日给予益气健脾中药复方5g/kg灌胃;针药组先给予益气健脾中药复方5g/kg灌胃,再行针刺(操作同针刺组);西药组每日抓取固定30min,给予多潘立酮3.15×10 g/kg灌胃;模型组和空白组每日抓取固定30min,给予生理盐水10ml/kg灌胃一次;所有治疗持续4周。实验过程中记录大鼠血糖、体重、饮食量、毛色、精神状态等一般情况,疗程干预完毕时,用酚红法检测胃排空率、小肠推进率,HE染色观察胃窦粘膜病理改变,免疫组化法测定胃窦中Ras同源物基因组成员A(RhoA)、Rho蛋白相关卷曲螺旋激酶2(ROCK2)的含量,免疫印迹(Western blotting,WB)法测定胃窦组织中磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚单位1(p-MYPT1)蛋白的表达。结果与空白组比较:模型组大鼠症状积分及血糖显著增高(P0.05)。(2)各治疗组胃排空率、小肠推进率均不同程度加快(P0.05或P0.01),其中针药组胃排空率升高显著(P0.01),与其他治疗组比较,差异有统计学意义。(3)HE染色显示各治疗组大鼠胃窦黏膜层病理改变均有不同方面的改善,以针药组综合改善最明显。(4)各治疗组胃窦组织RhoA、ROCK2、p-MYPT1、p-MLC蛋白表达水平均升高(P0.05或P0.01),其中针药组p-MYPT1、p-MLC蛋白升高显著(P0.01),与其他治疗组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论(1)针刺结合益气健脾中药复方治疗能够增强DGP大鼠胃肠动力,改善DGP大鼠相关症状,且作用效果较单独使用中药复方更好。(2)针刺结合益气健脾中药复方增强胃肠动力的作用机制可能与上调胃窦RhoA/ROCK信号通路,增加p-MYPT1、p-MLC蛋白的表达,促进胃平滑肌收缩有关。