加州新小绥螨对二斑叶螨和西花蓟马捕食作用SCAR检测和定量评价

作     者：杨强强 

作者单位：安徽农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐学农

授予年度：2020年

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 

主      题：二斑叶螨 西花蓟马 SCAR标记 实时荧光定量PCR 加州新小绥螨 定性检测 定量评价 

摘      要：二斑叶螨和西花蓟马是广泛分布在世界各地的害虫,两者对农业生产造成了巨大的威胁。在农业生产过程中采用化学农药对两者进行防治,由于害虫抗药性强同时化学防治也会造成植物和害虫的同时减少,常常导致农药污染和杀灭天敌等负作用,并不能得到很好的防治效果,因此利用捕食性天敌进行生物防治成为一项行之有效的措施。围绕捕食螨的田间防效实验中,不能直接研究其取食何种害虫以及对害虫捕食量的问题,本研究采用SCAR(Sequence Characterized Amplified Regions)分子标记和实时荧光定量PCR技术建立了加州新小绥螨对二斑叶螨和西花蓟马捕食作用的定性检测和定量评价技术体系。根据Gen Bank中已知的二斑叶螨序列设计1对二斑叶螨特异性引物TU220,其扩增片段大小为180 bp;检测结果显示,上述引物只对不同虫态和性别的二斑叶螨具有扩增作用。根据Gen Bank中已知的西花蓟马序列,采用周力兵等人设计的1对西花蓟马特异性引物,其扩增片段大小为434 bp;检测结果显示,上述引物只对不同虫态和性别的西花蓟马具有扩增作用。研究表明,SCAR分子标记技术可用于定性检测捕食螨取食何种叶螨和蓟马的研究。以多拷贝线粒体DNA为基础,根据二斑叶螨和西花蓟马特有片段设计荧光定量PCR检测引物,利用质粒DNA标准曲线,测出不同龄期的DNA拷贝数分别为卵5.77×10、幼螨27.45×10、若螨34.63×10、成螨59.81×10。确定捕食数量和消化时间与捕食螨对二斑叶螨和西花蓟马捕食作用的定量检测的关系,捕食二斑叶螨的相关关系式分别为捕食数量:Y=0.3689X+4.002(R=0.9346)和消化时间:Y=-0.21X+5.983(R=0.9713)捕食西花蓟马的相关关系式分别是捕食量:Y=0.1827X+6.0405(R=0.9477)和消化时间:Y=-0.0791X+7.2339(R=0.9011)。本研究通过加州新小绥螨对二斑叶螨和西花蓟马捕食作用定性定量评价体系的建立,为准确评价捕食螨对二斑叶螨和西花蓟马控制作用提供了理论基础,为充分开发利用天敌捕食螨控制二斑叶螨和西花蓟马的发生与为害具有重要的指导意义。