白芍总苷对糖尿病肾病大鼠肾组织炎症因子及Nephrin蛋白的影响研究

作     者：潘柳叶 

作者单位：右江民族医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：杨发奋

授予年度：2020年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：白芍总苷 糖尿病肾病大鼠 MCP-1 TNF-α Nephrin 

摘      要：目的:探究白芍总苷（total glucosides of paeony,TGP）对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及足细胞Nephrin蛋白表达的影响及其对肾脏保护作用。方法:（1）将大鼠随机分为对照组和模型组,模型组腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）72h后测大鼠空腹血糖,2w后测大鼠24 h尿蛋白定量（24h urinary protein,UAER）建立DN模型,造模成功后的大鼠随机分成DN组和TGP治疗组。TGP治疗组按低、中、高三个剂量随机分组,每日分别予50、100、200mg/kg TGP灌胃至8w后;对照组和DN组予等量生理盐水灌胃。（2）实验终点观察各组大鼠体质量、血糖、尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、肌酐（serun creatinine,Scr）、UAER。（3）行苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE）,免疫组化检测肾组织中MCP-1、TNF-α及Nephrin蛋白的分布和表达情况,RT-PCR检测肾皮质中Nephrin m RNA的表达情况。结果:（1）与对照组相比,DN组大鼠出现多饮、多食、多尿及体重下降的糖尿病（diabetic mellitus,DM）症状。TGP三个剂量治疗组大鼠均未出现明显血糖下降及体重回升。（2）TGP三个剂量治疗组BUN水平较DN组降低（P0.01）;TGP高剂量组大鼠UAER较DN组减少（P0.01）;TGP三个剂量治疗组大鼠Scr与DN组比较均无差异（P0.05）。（3）肾组织HE染色:对照组肾小球、肾小管及间质结构完整,未见异常改变;DN组肾小球肥大,系膜增生,基底膜增厚,肾小管肿胀、管腔狭窄,间质散在炎性细胞浸润,集合管边缘炎症细胞浸润明显;TGP三个剂量治疗组病理改变较DN组有不同程度减轻。（4）RT-PCR结果显示:与对照组比较,DN组及TGP三个剂量治疗组肾组织Nephrin m RNA表达下降（P均0.05）。与DN组比较,TGP中、高剂量组Nephrin m RNA表达升高（P0.05）;TGP低剂量组Nephrin m RNA表达无明显升高（P0.05）。（5）免疫组化:观察肾组织见MCP-1、TNF-α在正常大鼠肾小球内少量表达;与对照组比较,DN组及TGP三个剂量治疗组肾组织中MCP-1、TNF-α蛋白表达明显增强（P均0.01）;与DN组比较,TGP三个剂量治疗组肾组织中MCP-1、TNF-α蛋白表达均降低（P均0.05）。观察肾组织见Nephrin沿肾小球足细胞毛细血管袢均匀分布;与对照组比较,DN组及TGP三个治疗组肾组织Nephrin蛋白表达降低（P均0.05）;与DN组比较,中、高剂量组Nephrin蛋白表达增高（P均0.05）;TGP低剂量组Nephrin表达未见明显增高（P0.05）。结论:（1）TGP对DN大鼠无明显降低血糖、减轻体重作用,但可减轻尿蛋白,有一定改善肾功能,保护肾脏作用。（2）TGP可能通过下调DN大鼠肾组织炎症因子MCP-1、TNF-α的表达,上调足细胞Nephrin蛋白表达,改善肾组织炎症,减轻足细胞损伤,从而延缓DN进展。