补中益气汤“要药”升麻柴胡配伍对洛哌丁胺便秘模型大鼠的影响及机制研究

作     者：赵则阔 

作者单位：上海中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：都广礼

授予年度：2019年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：补中益气汤 要药 脾虚便秘 胃肠激素 神经递质受体 

摘      要：目的:观察补中益气汤“要药升麻、柴胡配伍及不同浓度的补中益气汤对洛哌丁胺诱导的大鼠便秘模型的影响,探讨补中益气汤“要药协同配伍的作用机制。方法:***大鼠分别按0 mg/Kg/d、2 mg/Kg/d、4 mg/Kg/d、6 mg/Kg/d的剂量每天两次皮下注射洛哌丁胺,连续给药2天或7天后,观察各剂量组大鼠小肠推进率的变化。***大鼠按照4 mg/Kg/d的剂量每天分两次皮下注射洛哌丁胺,复制小肠推进延迟大鼠模型,造模成功后分别灌胃给予1倍剂量补中益气汤、0.5倍剂量补中益气汤、0.25倍剂量补中益气汤和5 g/Kg/d的大黄,干预5天后处理并检测:（1）不同给药组大鼠小肠推进率的变化;（2）各组大鼠血清MTL、Gas和VIP含量的变化;（3）各组大鼠小肠组织形态的变化。***大鼠按照4 mg/Kg/d的剂量每天分两次皮下注射洛哌丁胺,复制肠推进延迟大鼠模型,成功后分别灌胃给予莫沙必利、0.25倍剂量升麻、0.25倍剂量柴胡、0.25倍剂量升麻柴胡、0.25倍剂量补中益气汤全方去升柴、0.25倍剂量补中益气汤全方,干预5天后处理并检测:（1）不同给药组大鼠小肠推进率的变化;（2）各组大鼠血清MTL、Gas、VIP、SS、Ghrelin含量的变化;（3）测定上述各组大鼠小肠组织scf/c-kit、PKCα、Drd2、CHR-M3 m RNA表达的变化。结果:1.不同剂量的洛哌丁胺对大鼠小肠推进率的影响:与正常组比较,模型1组小肠推进率显著降低（P0.05）,模型2组小肠推进率显著下降（P0.01）,模型3组小肠推进率显著下降（P0.01）。其中模型2组（4mg/kg/d）和模型3组（6mg/kg）更为显著。2.不同剂量的补中益气汤对洛哌丁胺诱导的便秘大鼠小肠推进率的影响:与正常组比较,模型组大鼠小肠推进率显著降低（p0.05）,与模型组相比,随着治疗剂量的减少,小肠推进率呈现逐步升高趋势,到达0.25倍剂量时,小肠推进率显著增加（p0.05）;与模型组相比,大黄治疗组略有下降,无统计学意义（p0.05）。3.不同剂量的补中益气汤对洛哌丁胺诱导的便秘大鼠血清胃肠激素MTL、GAS、VIP的影响:剂量梯度组中的各组动物血清中的MTL、GAS、VIP与正常组相比,模型组动物血清中MTL、GAS含量均降低（p0.01）,VIP含量升高（P0.01）;与模型组相比,1倍剂量原方组、0.5倍剂量原方组、0.25倍剂量原方组大鼠的MTL含量逐渐上升（P0.01、P0.01、P0.01）,1倍剂量原方组、0.5倍剂量原方组、0.25倍剂量原方组大鼠的GAS含量逐渐上升（P0.05、P0.01、P0.01）,1倍剂量原方组、0.5倍剂量原方组、0.25倍剂量原方组大鼠的血清VIP含量逐渐下降（P0.05、P0.01、P0.01）,大黄组对MTL、GAS、VIP的影响无统计学意义（P0.05、P0.05、P0.05）,还呈现出与治疗组相反的趋势。4.不同剂量的补中益气汤对洛哌丁胺诱导的便秘大鼠胃肠形态:模型组大鼠的胃肠有胀气现象,1倍剂量补中益气汤组有轻微胀气现象,0.5倍剂量补中益气汤组、0.25倍剂量补中益气汤组、正常组胃肠颜色、形态正常,无充血、水肿等。光学显微镜下,模型组和大黄组小肠组织粘膜损伤严重、大量坏死细胞脱落,大量炎症细胞浸润,粘膜层和肌层变窄。各个治疗组,有少量炎症细胞浸润的现象,偶尔发现个别样本固有层出现水肿的情况,轻微的损伤程度。正常组无明显损伤等异常现象。5.补中益气汤“要药配伍对洛哌丁胺便秘大鼠小肠推进率的影响:与正常组比较,模型组大鼠小肠推进率显著降低（p0.05）;较模型组而言,阳性组、0.25倍升麻柴胡组（升柴组）、0.25倍的全方去升麻柴胡组（全方去升柴组）、0.25倍全方组（全方组）的小肠推进率显著增加（p0.05、p0.01、p0.01、p0.05,）。6.补中益气汤“要药配伍组中洛哌丁胺便秘大鼠胃肠激素Ghrelin、VIP、MTL、GAS、SS的含量变化:便秘模型大鼠胃肠动力的指标中具有抑制胃肠运动的血管活性肠肽与具有促进胃肠运动的胃动素和胃泌素呈现相反的变化趋势,即抑制性胃肠激素VIP含量升高,促胃肠运动的激素MTL、GAS下降;具有促进胃肠动力的Ghrelin和抑制胃肠动力的SS均没有显著变化。补中益气汤组和“要药升麻柴胡组均能够能够升高兴奋性胃肠激素GAS、MTL的含量,单独使用升麻、柴胡时对GAS和MTL的含量变化影响不大;补中益气汤全方组可以有效降低VIP的含量,“要药升麻柴胡组和单独使用柴胡也可以降低VIP含量,全方去升麻柴胡对VIP含量没有影响。本次选择的阳性药物莫沙必利对VIP有一定的影响,对MTL、GAS、SS、Ghrel