针刺预处理对大负荷训练大鼠骨骼肌mTOR信号通路的影响

作     者：朱学东 

作者单位：上海中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：高明

授予年度：2019年

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

主      题：针刺预处理 大负荷训练 骨骼肌 mTOR 蛋白质 

摘      要：目的:研究针刺预处理对大负荷训练大鼠骨骼肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路的调节作用。方法:96只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组(Normal,N=32只)、模型组(Model,M=32只)、针刺预处理组(Acupuncture Pretreatment,AP=32只)。N组不训练、不针刺,只进行与AP组相同的抓取动作;M组采取1次/天,6次/周,共8周的连续递增大负荷平板跑步训练;AP组采取针刺“足三里、关元穴后进行与M组相同的训练方案,针刺1次/天,20min/次,6次/周,共8周。分别于第2周、5周、8周、9周运动或调整休息24h后随机选取各组中8只大鼠取右侧腓肠肌,用RT-PCR法检测Akt、m TOR、p70s6k、4E-BP1、AMPK m RNA的表达。蛋白质印迹法测量m TOR、p70s6k蛋白及其磷酸化的表达。结果:1、各组大鼠体重变化呈现增高趋势,但大负荷训练抑制了大鼠体重的增加,1周后M和AP组均较N组降低(P0.01,P0.05);4周后M组较N组降低(P0.05),AP组较M组增加(P0.05);5周后M组和AP组均较N组降低(P0.01,P0.05);6周后M组较N组降低(P0.01),AP组较M组增加(P0.01);7周后M组较N组体重降低(P0.01),AP组较M组增加(P0.05);8周后M组和AP组均较N组降低(P0.01,P0.01);2、腓肠肌肌肉质量指数变化:2周后,AP组较N组低(P0.01);8周后,AP组较N组低(P0.01);AP组较M组低(P0.05);3、Akt m RNA含量:5周后,AP组较M组和N组均增加(P0.05,P0.05);8周后,M组较N组增加(P0.05),AP组较M组和N组增加(P0.05,P0.01);4、m TOR m RNA含量:2周后,M组较N组含量增加(P0.01),AP组较M组含量降低(P0.01);5周后,AP组较M和N组含量均增加(P0.01,P0.01);8周后,M组较N组含量增加(P0.01),AP组较M组和N组含量均增加(P0.01,P0.01);5、p70s6k m RNA含量:2周后,M组较N组增加(P0.01),AP组较M组降低(P0.01);5周后,AP组较M和N组均增加(P0.01,P0.01);8周后,M组较N组增加(P0.01),AP组较M组和N组均增加(P0.01,P0.01);6、4E-BP1 m RNA含量:2周后,M组较N组降低(P0.05),AP组较N组降低(P0.01);7、AMPK m RNA含量:5周后,AP组较M组降低(P0.05);8、m TOR蛋白含量及其磷酸化(m TOR-ser2488):2周、5周、8周后,AP组较N组增加(P0.01,P0.01,P0.05);AP组P-m TOR较M组增加(P0.01,P0.01,P0.01);9、p70s6k蛋白含量及其磷酸化(Thr389):8周后,AP组P-p70s6k较M组增加(P0.01);结论:1、8周大负荷训练增加了大鼠骨骼肌Akt,m TOR,p70s6k m RNA的表达,这可能是大负荷训练促进运动能力的机制之一。2、针刺预处理相对于大负荷训练进一步增加了8周大负荷训练大鼠骨骼肌Akt、m TOR、p70s6k m RNA的表达,并导致m TOR及其下游信号蛋白p70s6k的磷酸化增加,其蛋白合成增加,表明针刺预处理相对于大负荷训练能够进一步提高运动能力。