柴胡三参胶囊含药血清对缺血缺氧模型大鼠心肌细胞CaMKⅡ及RyR2表达的影响

作     者：杨艳萍 

作者单位：湖南中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘建和

授予年度：2019年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：柴胡三参胶囊 心肌细胞 CaMKⅡ RyR2 

摘      要：目的:通过观察柴胡三参胶囊含药血清对缺血缺氧大鼠心肌细胞CaMKⅡ及RyR表达的影响,探讨柴胡三参胶囊治疗缺血性心律失常的作用机制。方法:将30只Wistar大鼠随机分为2组,采用血清药理学方法制备空白血清及柴胡三参胶囊含药血清,体外培养H9C2心肌细胞,采用无糖培养基和安宁包缺氧体系建立缺血缺氧模型,取对数生长期的心肌细胞随机分为6组:正常组、空白组、模型组、柴胡三参组、KN-62组、KN-62+柴胡三参组。用CCK-8法检测试剂盒分别测定不同浓度含药血清及不同缺氧干预时间下H9C2心肌细胞的存活率以确定最佳含药血清浓度,最佳缺氧干预时间。通过倒置显微镜观察各组心肌细胞生长及形态变化,采用Western blot法检测H9C2心肌细胞CaMKⅡ、RyR蛋白,RT-PCR法检测CaMKⅡ、RyR mRNA的表达。结果:1.与5%、20%含药血清浓度组比较,10%含药血清浓度组细胞存活率最高,组间比较有显著差异(p0.05),柴胡三参组和柴胡三参+KN-62联合组相比,差异无统计学意义(p0.05)。结论:1.10%柴胡三参胶囊含药血清干预下H9C2心肌细胞存活率最高,对细胞毒性最低。2.H9C2心肌细胞缺血缺氧干预最佳时间点为4h。3.柴胡三参胶囊含药血清通过抑制CaMKⅡ及RyR的表达来达到缺血缺氧下对心肌细胞的保护作用,这可能是其抗心律失常的作用机制之一。