腺苷A1受体激动剂预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后HIF-1α及GPx1的影响

作     者：郭哨恺 

作者单位：新乡医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：谭军

授予年度：2020年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：缺氧诱导因子-1α 谷胱甘肽过氧化物酶1 预处理 脑缺血再灌注 腺苷A1受体激动剂 

摘      要：背景随着人民生活水平的提高,缺血性脑血管疾病发病率也越来越高,给社会和家庭带来巨大的经济负担。目前缺血性脑血管疾病的治疗方法有药物治疗、溶栓治疗、介入治疗等,这些方法在一定程度上给缺血性脑血管疾病患者带来了极大的获益,他们的预后得到了极大的改善。由于患病基数很大,仍有许多患者得不到满意的治疗效果,其中有许多因素制约着疾病的转归,我们注意到一项很重要的不利因素-脑缺血再灌注损伤,脑缺血再灌注损伤即缺血的脑血管再通后反而使脑损伤加重。溶栓及介入治疗可使闭塞的脑血管再通,不可避免的要面临脑缺血再灌注损伤,研究改善脑缺血再灌注损伤的相关药物,有望改善缺血性脑血管疾病的预后。本实验选用腺苷A1受体激动剂环己基腺苷对大鼠脑缺血再灌注模型预处理,观察其保护作用并进一步探究其发病机制。缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)可通过调节下游靶基因表达来使脑缺血再灌注损伤减轻,谷胱甘肽过氧化物酶1(Glutathione peroxidase 1,GPx1)可通过抗氧化来减轻脑缺血再灌注损伤,腺苷A1受体激动剂是否可通过上调HIF-1α和GPx1蛋白的表达来发挥脑保护作用是本次实验研究的重点。目的探讨腺苷A1受体激动剂预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其与HIF-1α与GPx1的关系。方法本实验选取雄性SD大鼠制作大脑中动脉栓塞(Middle cerebral arteryocclusion,MCAO)动物模型。60只SD大鼠随机分为3组:假手术组(F组)、脑缺血再灌注组(IR组)、腺苷A1受体激动剂环己基腺苷预处理组(AP组),每组20只大鼠。各组按脑缺血再灌注时间分为再灌注后2h组,6h组,24h组,48h组,每个亚组5只大鼠。IR组及AP组大鼠按照标准的MCAO法制备动物模型,F组大鼠模型无插入线栓操作,余同IR组及AP组。对F组、IR组、AP组的48h亚组大鼠行HE染色法检测其脑组织病理学改变,行头颅MRI检查观察梗死灶的改变;对F组、IR组、AP组不同时间点大鼠行免疫组化法检测脑组织内HIF-1α和GPx1蛋白的表达情况,并行神经功能评分了解大鼠神经缺损症状的改变情况。结果***组大鼠各个时间点神经功能评分均较F组升高,AP组较IR组大鼠神经功能评分降低(P0.05)。2.脑缺血再灌注48h后大鼠脑组织病理结果示AP组脑细胞损伤较IR组明显减轻,F组脑细胞正常。3.脑缺血再灌注48h后大鼠头颅MRI见AP组缺血灶体积较IR组明显减小,F组无缺血灶。4.随着缺血再灌注时间的延长,IR与AP组HIF-1α蛋白表达表现出一致的变化趋势:2h至24h持续升高直达高峰,48h开始下降,且AP组较IR组HIF-1α蛋白表达增多(P0.05)。***组及AP组GPx1蛋白表达从脑缺血再灌注后2h开始逐渐降低,24h降至最低,48h有所升高,且AP组较IR组GPx1蛋白表达升高(P0.05)。结论腺苷A1受体激动剂预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,通过上调HIF-1α及GPx1蛋白的表达是腺苷A1受体激动剂预处理发挥脑保护作用的相关分子机制。